ROS活性氧有哪些检测方法？

1、电子顺磁共振技术( electron paramagnetic resonance , EPR )

EPR是一种检测自由基的波谱学方法, 是明确评估生物系统中以氧气为中心的自由基生成的“金标准”。由于O 2•-,•OH 反应活性高、寿命短 EPR 信号不易直接检出, EPR 与自旋捕获技术( spin tranps ) 相结合可弥补这一缺陷。

2、荧光染色法

荧光探针通常对氧化剂敏感，并且在被氧气氧化之前是非荧光性的。使用广泛的成员是二氢乙啶（DHE），二氯二氢荧光素（DCFH-DA）和Amplex Red（尽管细胞不可渗透）。细胞可渗透的物质有助于反映细胞区室的氧化状态，提供有关刺激下自由基产生的信息。这些探针大多数通过单电子自由基机理被氧化，产生探针自由基中间体并产生荧光产物。

3、化学发光法

化学发光分析通常用于超氧化物的检测。与荧光分析类似，化学发光探针对自由基敏感，易于操作。探针可以与O2•-形成光子， 并由光度计吸收计数器捕获，而无需使用激发光光源。

4、色谱方法

色谱法用于羟基自由基及其反应产物的分离和鉴定。•OH与特定的试剂反应，生成可通过色谱分析检测到的稳定化合物，其中通常使用液相色谱及其与质谱的组合。通常用于稳定自由基的试剂是苯甲酸，水杨酸和DMSO。

5、分光光度法

6、电化学生物传感器

7、电化学生物传感器

基于荧光蛋白的氧化还原探针是通过荧光蛋白（FPs）和原核氧化还原敏感蛋白的组合而设计的。重组蛋白通过质粒或腺病毒被引入细胞，并靶向亚细胞器，从而报告某些区域的氧化还原状态。

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