5-TAMRA NHS ester,5-四甲基罗丹明 N-羟基琥珀酰亚酯,反应步骤
中文名称: 5-四甲基罗丹明 N-羟基琥珀酰亚酯
英文名称: 5-TAMRA N-Hydroxysuccinimide Ester
别名 / Synonyms: 5-(和6-甲基)四甲基罗丹明 NHS 酯, 5-TAMRA-NHS, TAMRA-NHS Ester
结构特征 / Structural Features
5-TAMRA NHS ester 是一种荧光标记试剂,结合了两个关键结构单元:
TAMRA 荧光基团:提供可见光荧光,激发波长约 545 nm,发射波长约 575 nm,可用于荧光成像和标记。
NHS 酯末端:活性羧基衍生物,通过羧基活化形成 N-羟基琥珀酰亚酯,使其能够与氨基(–NH₂)形成稳定的酰胺键。
整体分子结构呈“荧光基团-活性 NHS 酯”模式,使其能够与蛋白质、肽链或其他氨基化分子共价连接,形成稳定的荧光标记。
反应步骤 / Reaction Steps
溶解与反应体系准备
取适量 5-TAMRA NHS ester,溶解于干燥的极性有机溶剂(如 DMSO 或 DMF),确保 NHS 酯活性不被水解。
准备含氨基的目标分子(如蛋白质、肽或氨基功能化纳米材料)溶液,缓冲液通常为弱碱性(pH 7.2–8.5)以促进酰胺键形成。
NHS 酯活化反应
NHS 酯在缓冲体系中遇到氨基产生亲核进攻,羧基与氨基形成稳定的酰胺键,NHS 作为离去基团释放。
反应温和,一般室温或略低温进行,避免荧光基团降解或水解副反应。
偶联反应控制
控制反应比例和 pH 值,避免过量 NHS 酯导致多位标记或非特异性结合。
反应时间一般为 30 分钟至数小时,根据目标分子浓度和反应体系调整。
纯化与去除副产物
反应完成后,通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除游离 5-TAMRA NHS ester 和释放的 NHS。
获得纯化的荧光标记产物,保证标记均一性和功能完整性。
表征与验证
紫外-可见光谱(UV-Vis):检测 TAMRA 吸收峰,确认标记成功。
荧光光谱:检测荧光强度和波长。
质谱或 SDS-PAGE(蛋白质标记时):确认偶联效率和标记分布。
通过上述步骤,5-TAMRA NHS ester 可高效与氨基化分子偶联,实现稳定荧光标记。其反应机制基于 NHS 酯与氨基的亲核加成反应,操作条件温和且选择性高,广泛应用于蛋白质标记、肽链修饰、纳米材料功能化及细胞/组织成像研究。
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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