ATTO 532 NHS，ATTO 532 N-羟基琥珀酰亚胺酯，绿色至黄绿色荧光染料

英文名称：ATTO 532 NHS

中文名称：ATTO 532 N-羟基琥珀酰亚胺酯

二、化学特性与用途概述

ATTO 532 NHS是一种绿色至黄绿色荧光染料，属于活性NHS酯修饰的荧光染料。其分子结构由荧光染料核心与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯活性基团组成。荧光核心具有芳香族或共轭多环结构，使其在激发光下产生稳定的荧光，激发波长约为532 nm，发射波长约为553 nm。NHS酯端可以与含有初级氨基（-NH₂）的分子共价结合，形成稳定的酰胺键，从而实现蛋白质、抗体、多肽或核酸的标记。ATTO 532 NHS的特点包括高光稳定性、化学稳定性以及水溶性适中，适合用于免疫荧光、流式细胞、多通道成像以及分子探针制备。

三、制备方法

ATTO 532 NHS的制备一般包括两步：荧光染料活化和NHS酯化。

1. 荧光染料活化
   首先，通过有机合成获得ATTO 532羧基衍生物。其核心分子结构经过特殊取代修饰，以增强量子产率和光稳定性。羧基衍生物具有可与NHS酯化反应的活性位点，同时保持染料核心的光学性质。

2. NHS酯化反应
   荧光染料羧基衍生物在干燥的有机溶剂中（如二氯甲烷、DMF或DMSO）与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）反应，同时加入碱性催化剂（如DCC，N,N'-二环己基碳二亚胺或EDC，1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺），生成活性NHS酯。反应过程温和，一般在室温下进行，避免高温导致染料结构破坏。

3. 纯化步骤
   反应完成后，通过硅胶柱层析或高效液相色谱（HPLC）分离纯化产物，去除未反应的NHS、DCC副产物及溶剂残留。纯化后得到的ATTO 532 NHS为稳定的固体或浓缩溶液，可在干燥条件下长期保存。

4. 质量控制
   纯化产物通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）以及紫外-可见光和荧光光谱分析确认结构和光学性质。保证其激发/发射波长、量子产率和NHS活性符合应用要求。

四、应用说明

制备得到的ATTO 532 NHS广泛用于：

• 蛋白质、抗体标记：形成稳定荧光标记，用于免疫荧光检测、Western blot和ELISA。

• 核酸标记：通过共价结合修饰DNA、RNA或寡核苷酸，实现FISH或实时定量PCR探针。

• 多通道成像：激发波长位于绿色区，可与蓝色或红色荧光染料组合，进行多重标记实验。

五、总结

ATTO 532 NHS是一种绿色荧光活性染料，通过NHS酯化实现与氨基化生物分子的共价结合。其制备方法主要包括荧光染料羧基衍生物合成、NHS酯化以及纯化和质量验证。产物具有光稳定性高、化学活性强、光谱特性明确的特点，可广泛应用于蛋白质标记、核酸探针以及多通道荧光成像实验，是实验室常用的活性荧光染料之一。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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