Biotin-BMCC盐酸盐,生物素-1-氯-3-甲基-2-硫代环己烷盐酸盐,反应条件
英文名称:Biotin-BMCC Hydrochloride
中文名称:生物素-1-氯-3-甲基-2-硫代环己烷盐酸盐
二、分子概述
Biotin-BMCC盐酸盐是一种功能化的生物素衍生物,由生物素通过短链连接子与巯基特异性活化剂BMCC(1-氯-3-甲基-2-硫代环己烷)偶联形成。该分子结构包含三个关键部分:
生物素基团:提供与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)高亲和结合能力,实现标记和捕获功能。
短链连接子:通常为羧基或酰胺桥梁,提供空间自由度,减少生物素标记对蛋白活性的干扰。
BMCC活性端:1-氯-3-甲基-2-硫代环己烷(BMCC)对蛋白质或多肽中的巯基(–SH)高度特异,能够在温和条件下与半胱氨酸残基形成稳定的硫醚键。
该化合物常以盐酸盐形式存在,提高水溶性和操作稳定性,便于生物体系实验应用。
三、反应条件
Biotin-BMCC盐酸盐的化学反应主要涉及巯基特异性偶联,其反应条件如下:
溶剂与缓冲体系
反应多在水溶液或缓冲体系中进行,如磷酸盐缓冲液(PBS, pH 6.5–7.5)或HEPES缓冲液。
缓冲液应避免含有竞争性巯基还原剂(如DTT、β-巯基乙醇),以免降低反应效率。
pH与温度控制
最适pH为6.5–7.5,中性或弱碱条件有利于巯基与BMCC反应形成稳定硫醚键。
温度通常控制在室温(20–25℃),避免高温导致蛋白变性或BMCC分解。
反应摩尔比与时间
为保证特异性偶联,Biotin-BMCC通常以1.2–2倍摩尔过量加入目标蛋白或多肽。
反应时间约为30分钟至2小时,具体根据蛋白浓度和巯基暴露程度调节。
光与氧的控制
BMCC活性端对氧敏感,反应可在避光条件下进行。
氧化条件下巯基可能形成二硫键,降低偶联效率,因此可在惰性气体保护或适量抗氧化剂存在下操作。
后处理与纯化
反应结束后,通过透析、凝胶过滤或离心柱去除未反应的Biotin-BMCC盐酸盐。
获得生物素标记蛋白或多肽,可用于链霉亲和素检测、荧光标记或免疫分析。
四、总结
Biotin-BMCC盐酸盐是一种巯基特异性生物素衍生物,通过BMCC活性端可在温和、中性条件下与蛋白质或多肽的巯基形成稳定硫醚键。反应条件包括pH 6.5–7.5的缓冲液、室温、避光操作及适当摩尔比控制。其高特异性和可控性使其在蛋白质标记、FRET探针构建、荧光检测及生物分子捕获实验中广泛应用。
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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