西安齐岳生物提供寡糖还原端荧光标记定制服务,支持葡萄糖、半乳糖、甘露糖、低聚糖、糖链片段等多类型寡糖的荧光修饰。可根据实验需求选择FITC、Cy系列、TAMRA、荧光素等标记基团,实现还原端定点偶联。服务涵盖标记方案设计、反应条件优化、纯化及结构表征,满足糖组学分析、生物识别及荧光示踪研究需求。

科研关键点
核心科研痛点 | 齐岳生物还原端定点标记解决方案 |
寡糖 / N - 糖 / O - 糖无天然荧光,无法直接荧光检测 | 还原胺化定点标记,仅糖链还原端单点共价偶联荧光团,赋予稳定可检测荧光 |
常规随机标记破坏糖链骨架与生物活性,干扰色谱 / 质谱解析 | 仅靶向还原端醛基反应,不修饰糖链中间羟基,最大程度保留天然结构与识别活性 |
标记条件剧烈,造成唾液酸、岩藻糖降解丢失 | 温和低损伤反应体系,最大程度保留特殊糖基完整性,无降解风险 |
标记效率不稳,游离染料难去除,干扰后续实验 | 成熟工艺保障标记效率≥80%,配套纯化方案,游离染料残留<2%,无检测干扰 |
技术原理:还原胺化(Reductive Amination)
寡糖还原端发生环-链互变,开环产生醛基;酸性条件下醛基与氨基型荧光探针生成席夫碱,经还原剂(氰基硼氢化钠 / 2-甲基吡啶硼烷)还原,生成稳定仲胺键,仅还原端单点标记,糖链中间羟基不参与反应,适合带游离还原端的寡糖、酶解释放 N-糖、O-糖链,唾液酸损失较低。

可选荧光标记染料(按应用场景)
染料 | 激发 / 发射 | 适用场景 |
2-AB(2-氨基苯甲酰胺) | 330 nm /420 nm | 糖组学 HPLC、CE-LIF 色谱分析,糖谱定量,主流糖分析标记 |
2-AA(2-氨基苯甲酸) | 320 nm /420 nm | 毛细管电泳,带电标记,适合低丰度寡糖分析 |
FITC-EDA | 495 nm /525 nm | 细胞水平结合、凝集素孵育实验 |
Cy3-EDA | 550 nm /570 nm | 共聚焦荧光显微镜,体外互作成像 |
Cy5-EDA / Cy5.5-EDA | 650 nm /670 nm;675 nm/695 nm | 体外 + 小动物活体成像,近红外检测 |
BODIPY 系列 | 488/510、590/620 nm | 高量子产率,耐光漂白 |
拓展方案:还原端先氨基化,再偶联 NHS-Cy7.5、ICG 等近红外染料,适配活体深度成像。
定制服务流程
方案评估:客户提供寡糖样品(干粉 / 水溶液),告知寡糖结构、分子量、是否含唾液酸,确定染料、样品量、目标标记效率;
还原胺化标记反应:优化 pH、温度、反应时长,选用低损伤还原剂,保护唾液酸 / 岩藻糖不降解;
纯化除杂:固相萃取 SPE、凝胶过滤 GPC,彻底去除未反应游离染料、盐离子;
全套质控表征:
HPLC:标记产物纯度≥90%,游离染料残留<2%;
MALDI-TOF-MS:分子量验证,确认单点标记;
UV-Vis:计算标记摩尔比;
可提供 ¹H-NMR 辅助结构确认;
产物交付:冻干粉末 / 水溶液,附带 COA 检测报告,7-15 个工作日交付。
定制真实科研案例
案例 1:硫酸化壳寡糖 Cy5.5 还原端标记(活体预实验)
客户底物:硫酸化壳六糖,500 nmol
定制需求:还原端定点标记 Cy5.5,用于小动物活体荧光示踪,考察寡糖体内分布
技术难点:底物带大量硫酸基团,反应条件易造成糖链降解;需要兼顾标记效率与产物水溶性
解决方案:优化缓冲体系,还原胺化标记,脱盐纯化,去除小分子盐与游离染料

案例 2:O-糖链 2-AA 标记,毛细管电泳 CE-LIF 检测
客户底物:黏蛋白酶解获得混合 O-糖,200 nmol
定制需求:2-AA 还原端标记,适配 CE-LIF 电泳分离检测
解决方案:还原胺化标记,固相萃取纯化

交付规格与样品要求
客户提供样品:最低投入50 nmol-1 μmol寡糖,建议干粉较佳;水溶液需除 Tris、含伯胺类杂质(伯胺会竞争消耗染料);
产物规格:nmol-μmol 级冻干品,溶于水 / PBS;
标记效率:常规≥80-90%(受寡糖结构影响);
适配实验:HPLC-FLD、毛细管电泳 CE-LIF、MALDI 质谱、凝集素芯片、细胞结合、小动物荧光成像。
可承接底物类型
合成寡糖:葡寡糖、甘露寡糖、壳寡糖、半乳寡糖等;
生物来源糖链:酶解释放 N-糖、O-糖;
中性寡糖、含唾液酸酸性寡糖、硫酸化寡糖。
咨询方式
电话:17778955912
邮箱:2997912684@qq.com
网站:http://www.qiyuebio.com
地址:陕西省西安市莲湖区永新路18号天赐苑6幢10302-B80号





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