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Stbl2感受态细胞

克隆感受态细胞;规格:0.1ml*10支 ;保存:特殊细胞需要-80℃保存

货号 规格 数量 价格
Q-0020991 100mg
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产品介绍
中文名称:Stbl2感受态细胞
规格:0.1ml*10支  
用途:生化试剂。(用于科研试验研究)  
保存:特殊细胞需要-80℃保存  
基因型  
F-mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1endA1longyrA96thisupE44relA1λ-Δ(lac-proAB)  
产品说明  
Stbl2菌株来源于JM109E.colistrain,适合克隆不稳定插入片段(正向重复序列,逆转录病毒序列等);mcrA突变和mcrBC-hsdRMS-mrrdeletion使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列;同时Stbl2也可用于慢病毒载体的构建。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。不存在lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。Stbl2感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19检测转化效率可达109cfu/μgDNA。  
操作方法  
1.Stbl2感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。  
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。  
3.向离心管中加入0.9mL室温S.O.C.培养基,使用其他培养基会降低转化效率。  
4.30℃,225rpm复苏90分钟。  
(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化controlPUC19计算转化效率,则需37℃,225rpm复苏60分钟。)  
5.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.培养基上。  
6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化controlPUC19计算转化效率,则需37℃培养过夜)  
注意事项  
1.感受态细胞**在冰上融化。  
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。  
3.转化高浓度的质粒或**率的连接产物可相应减少**用于涂板的菌量。  
附:  
S.O.C.Medium配方:  
2%Tryptone  
0.5%YeastExtract  
10mMNaCl  
2.5mMKCl  
10mMMgCl2  
10mMMgSO4  
20mMglucose  
NaOH调pH值至7.0  
参数信息
外观状态: 固体或粉末
质量指标: 95%+
溶解条件: 有机溶剂/水
CAS号: N/A
分子量: N/A
储存条件: -20℃避光保存
储存时间: 1年
运输条件: 室温2周
生产厂家: 西安齐岳生物科技有限公司
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