CM-DiO标记BMSCs（大鼠骨髓间充质干细胞）

一、染料背景

CM-DiO（Chloromethylbenzamido-DiO）为绿色荧光脂溶性染料，激发/发射波长约为484/501 nm，可稳定嵌入细胞膜，适合长时间标记间充质干细胞（MSCs）进行体内外迁移跟踪。

二、标记原理

染料亲脂，嵌入细胞膜脂双层，通过共价键与巯基残基结合，使染料在细胞膜上稳定表达。用于标记BMSCs时不影响其增殖和分化能力。

三、标记步骤

1. 将CM-DiO溶解于DMSO制成母液；
2. 稀释至最终浓度1–5 μM于预温培养基中；
3. 与BMSCs孵育20–30分钟于37℃避光条件下；
4. 洗涤去除未结合染料，换入新培养基继续培养；
5. 用荧光显微镜或流式检测绿色荧光标记情况。

四、用途方向

BMSC迁移研究：骨损伤、肝损伤、心梗修复中的细胞走向分析；

干细胞示踪：组织工程与再生医学中细胞归巢实验；

与功能标记联合应用：如联合核酸转染，观察功能表达。

五、注意事项

染料易光解，使用过程需避光；

标记细胞不建议长期冷冻保存，以免膜结构破坏影响荧光；

染色后细胞稳定表达荧光约5–10天。