稳定敲低Notch3基因H1299细胞系，定制服务

首先，设计针对 Notch3 基因的 shRNA 序列。通过对 Notch3 基因 mRNA 序列的分析，结合生物信息学工具，选择合适的靶点。优先选择在 Notch3 基因编码蛋白的功能关键区域对应的 mRNA 部分，如 Notch3 的胞外区、跨膜区或胞内区中对信号转导有重要作用的序列，且要保证所选序列与其他基因的同源性低，以减少脱靶效应。例如，在 Notch3 基因胞内区参与激活下游信号通路的结构域附近选取长度约为 20bp 的独特序列作为 shRNA 的靶向序列。

合成两条互补的寡核苷酸链来构建 shRNA。一条链包含与 Notch3 基因 mRNA 互补的序列、环序列（如 TTCAAGAGA）和部分反向互补序列，另一条链则是其完全互补链。将这两条寡核苷酸链在合适的缓冲液中进行退火处理，通过加热至约 95℃后缓慢冷却至室温，形成具有发夹结构的双链 shRNA。

选择合适的载体用于构建 shRNA 表达载体。可以选择质粒载体，其通常包含启动子（如 U6 启动子用于驱动 shRNA 转录）、多克隆位点（MCS）和选择标记（如嘌呤霉素抗性基因）。对于 H1299 细胞，可根据其对不同抗生素的敏感性和转染特性来选择合适的载体。

齐岳生物提供基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

产品：

构建Cas9和gRNA表达载体

构建CRISPR KO（基因敲除）

构建CRISPRa（基因激活）文库

构建CRISPRi（基因抑制/沉默）

构建CSD（氨基酸39-112）单结构域缺失的截短体质粒

构建eGFP基因敲入的报告细胞

构建N端，C端，N+C端单结构域缺失的截短体质粒

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。