在初所建立的PCR方法中只要引物带有错配碱基便可使PCR产物的末端引入突变。但是诱变部分并不总在DNA的中间部分进行诱变。目前采用重组PCR进行定位诱变，可以在DNA片段的任意部位产生定位突变。PCR介导的定点突变一般需要4种引物（1、2、3、4），引物由带数字的箭头表示。突出部分代表错配碱基及 PCR 产物中产生的突变。图5中引物 1 和引物 3 互补, 引物 2 和引物 4 互补。两种单一限制性内切酶位点用于使质粒线性化。如要进行另外的单一特异位点的突变, 只需合成新的引物 1 和引物 3, 可用同一种经酶切割的模板。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

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