PB转座子系统构建基因过表达细胞,技术介绍
基因过表达(gene overexpression)是将目的基因编码区序列(CDS)克隆到相应的质粒或病毒载体上,利用载体骨架上构建的调控元件,使基因整合到细胞染色体中,并大量转录和翻译,从而实现目的基因的稳定过表达。此外,还可以选择报告基因进行示踪或抗性基因进行筛选。在基因功能的研究中,稳定过表达细胞株弥补了瞬时感染或转染表达时间短的缺陷,便于长期观察基因对于细胞功能的影响以及蛋白间相互作用。常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、杀稻瘟菌素(Blasticidin)和嘌呤霉素(puromycin)。
PB转座子可利用质粒转染(非病毒转导)把感兴趣的基因长期稳定地整合到靶细胞基因组,具有安全、高效、负载容量大的优点,且相对于一般载体,其插入位点为TTAA,因此具有比较高的特异性。PB转座系统包含两个载体:一个载体被称为辅助质粒,负责编码转座酶;另一个载体被称为转座子质粒,包含两个末端重复序列(TRs)以及两者之间的被转座区域。 西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括: (1)过表达质粒构建; (2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变) (3)构建基因截短体质粒; (4)亚克隆质粒构建; (5)通过慢病毒介导的基因过表达; (6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减 (7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除 定制服务: miRNA、lncRNA表达载体构建 Crispr/Cas9 基因编辑慢病毒包装 腺病毒包装技术服务 细胞实验技术服务 shRNA真核表达载体构建 gRNA载体(单gRNA)构建 gRNA载体(双gRNA)构建 基因过表达细胞稳转株构建 基因敲入细胞稳转株构建(插入片段<3 kb) 点突变细胞稳转株构建 基因敲除细胞稳转株构建(移码突变) 基因敲除细胞稳转株构建(缺失突变) 注意事项: 本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。 使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。 请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。如有侵权,可联系我们删除