质粒以及慢病毒的基因过表达方法

简单的理解，质粒属于慢病毒的前一步，二者的过表达以及敲低原理都是一样的。

基因过表达

常用方法是将目的基因的编码区(CDS)构建到载体中导入细胞内，细胞利用自身元件把储存在表达质粒DNA中的遗传信息转录、翻译成具有生物活性的蛋白质分子，使基因的表达量增加

但该技术受限于载体容量，只能用于研究一定长度内的基因

过表达原理

启动子+目的基因CDS

RNAI

RNAi，即RNA干扰为人工下调基因表达的技术

RNAi使用中，干扰片段(21bp)是关键，通常叫做靶点序列

干扰片段与蛋白形成RISC复合物，结合mRNA(完全互补配对)，切断mRNA，使得mRNA降解，达到阻止基因表达的目的(mRNA层面起作用)

什么是质粒？

质粒是存在于细胞中的小型环状DNA分子，具有自主复制的能力，携带着特定的基因片段，并在实验室中被广泛用于基因研究和生物工程。

2.什么是慢病毒？

单链RNA病毒，可以整合到宿主基因组上，进行转录和翻译，2-4 天即可表达，长期稳定表达。

3.慢病毒的优势？

a. 表达时间长：慢病毒通过将外源基因整合到宿主细胞基因组上，可实现目的基因长时间稳定的表达，不随着细胞分裂传代而丢失，是细胞实验的首选。b. 安全性高：未发现致病性，已被用于 CAR-T 治疗作用于人体。c. 免疫原性低：直接注射活体组织不易造成免疫反应，适用于动物实验。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。如有侵权，可联系我们删除