条件性基因敲入小鼠DAAO-TGCdh5构建原理

为了研究表达酵母D-氨基酸氧化酶(DAAO)转基因小鼠中神经元和血管内皮的神经血管氧化应激对血管疾病的影响，构建了内皮特异性启动子Cdh5控制下DAAO表达的转基因小鼠DAAO-TGCdh5。当这些转基因小鼠被喂食D-氨基酸时，DAAO在目标组织中表达并产生过氧化氢，含有DAAO和荧光比率H2O2生物传感器HyPer10融合蛋白的转基因载体（如图1所示），通过向DAAO提供D-氨基酸，使得作者能够在转基因动物或分离的细胞或组织中生成H2O2，并通过HyPer的比率成像检测H2O2。

除此以外，这个转基因构建体包含一个由LoxP位点包围的终止密码子（STOP），并使用CRISPR/Cas9方法将该载体靶向插入Rosa26位点。通过将这个条件诱导的DAAO转基因系与在VE-钙粘蛋白（Cdh5）启动子的控制下表达Cre重组酶的小鼠交配，以创建DAAO-TGCdh5小鼠品系。

Cdh5启动子已被广泛鉴定为内皮细胞特异性启动子，并已用于构建许多转基因小鼠系来研究内皮特异性基因表达。

齐岳生物生物提供基因敲入细胞定制服务，荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等均可实现。我们提供其定制服务，包括多种类型的细胞基因KI和全流程的服务支持。

服务：

报告基因敲入

基于puro标记筛选的safe harbor位点基因敲入（标记筛选）

基因敲入小鼠

条件性基因编辑小鼠

CRISPR Cas9基因敲入

提供多种类型的基因敲入服务

荧光蛋白定点敲入

蛋白标签定点敲入

HiBiT定点敲入

点突变小鼠

转基因小鼠

定点条件性基因过表达小鼠

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

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