cas:367-93-1,Isopropyl 1-Thio-β-D-galactopyranoside的反应条件
名称:Isopropyl 1-Thio-β-D-galactopyranoside
纯度:95%+
反应条件
IPTG 是一种常用的 β- 半乳糖苷酶诱导剂,在分子生物学和基因工程中用于调控原核生物(如大肠杆菌)的基因表达,其作用机制和反应条件如下:
诱导机制:IPTG 作为乳糖类似物,可与乳糖操纵子的阻遏蛋白结合,使其构象改变并从操纵基因上解离,从而启动下游基因(如 β- 半乳糖苷酶基因 lacZ)的转录。
典型反应条件:
浓度:通常使用终浓度为 0.1–1 mM,具体需根据菌株和质粒载体优化。高浓度(如 5 mM)可能导致细胞毒性,低浓度可实现更严格的诱导调控(如用于蛋白可溶性表达)。
温度:诱导温度一般为 18–37℃。低温(如 18–25℃)可减少包涵体形成,促进可溶性蛋白表达;高温(如 37℃)加速诱导,但可能增加错误折叠。
时间:诱导时间通常为 2–20 小时,需根据蛋白表达水平和细胞生长状态调整。对数中期(OD600=0.4–0.6)添加 IPTG 可平衡细胞生长和蛋白表达效率。
培养基:常用 LB 培养基,若需降低背景表达,可使用无糖培养基(如 M9 培养基)。
注意事项:IPTG 不可被细菌代谢,需在实验中持续存在以维持诱导效果;对于严谨型启动子(如 pTac),可搭配葡萄糖抑制本底表达,通过 “葡萄糖 - IPTG 双调控” 实现更精确的基因表达控制。
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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