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生物素-花生四烯酸,Biotin-Arachidonic Acid:生物素亲和纯化与脂质代谢示踪新工具
发布时间:2025-05-27     作者:ssl   分享到:

生物素-花生四烯酸,Biotin-Arachidonic Acid:生物素亲和纯化与脂质代谢示踪新工具

生物素-花生四烯酸(Biotin-arachidonic acid)产品信息

一、基本信息

中文名称:生物素标记花生四烯酸、生物素-花生四烯酸

英文名称:Biotin-arachidonic acid

别名:Biotin-AA、Biotinylated arachidonic acid

分类:脂类探针、脂肪酸衍生物、生物素修饰分子

生物素-花生四烯酸 是通过将花生四烯酸(Arachidonic acid, AA)与生物素(Biotin)进行共价偶联,制得的一种双功能脂类衍生物。该分子既保留了花生四烯酸作为信号脂质的生物学活性,又具备生物素的高度亲和性修饰能力,能够与链霉亲和素(Streptavidin)系统结合,从而应用于脂类分子的富集、捕获、成像、标记与分子交互研究。

 

二、理化性质

性质类别 参数

分子量 约600–750 Da(取决于连接臂结构)

外观 类白色至淡黄色固体或冻干粉

纯度 >95%(HPLC)

溶解性 溶于DMSO、DMF、甲醇、乙醇,低极性缓冲液中可乳化

稳定性 避光、低温条件下稳定,避免强氧化环境

储存建议 –20°C 干燥避光保存,可短期置于4°C使用,避免反复冻融

 

三、结构特点

生物素-花生四烯酸由三部分组成:

花生四烯酸(Arachidonic acid, AA)

是细胞膜磷脂中的关键不饱和脂肪酸成分;

为前列腺素、白三烯等炎症介质的生物前体;

在细胞信号转导、炎症反应、免疫应答中具有重要功能。

生物素(Biotin)

一种水溶性维生素,具有极高的与链霉亲和素结合亲和力(Kd ≈ 10⁻¹⁴ M);

可用于标记、捕获、固定、富集目标分子或复合物;

常用于分子追踪、生物素化免疫检测系统。

连接臂(Linker)

连接AA与生物素的桥接结构,常见为柔性烷基链或PEG链;

保证生物素结合位点不受AA空间结构干扰,同时不影响AA与酶或膜的作用。

生物素标记花生四烯酸、生物素-花生四烯酸 

四、合成简述

活化反应:将AA羧基活化(如EDC/NHS);

偶联反应:与生物素-胺(Biotin-amine)或带氨基的PEG-biotin进行反应;

纯化步骤:通过HPLC纯化得到高纯度Biotin-AA;

表征方式:MS、1H NMR、HPLC分析。

 

五、应用价值与功能特点

1. 脂质探针与分子示踪

通过链霉亲和素荧光或磁珠系统,标记Biotin-AA,可实现其在细胞、组织或膜系统中的定位追踪。

2. 脂酶底物研究

生物素标记的AA可作为环氧合酶(COX)、脂加氧酶(LOX)、磷脂酶A₂等酶的底物或抑制剂评估工具。

3. 信号通路激活监测

可诱导炎症信号,如NF-κB通路,并结合生物素链霉亲和素系统分析AA代谢产物的形成过程。

4. 拉下实验(Pull-down)与蛋白相互作用分析

使用链霉亲和素磁珠富集与AA结合的蛋白或脂质相互作用复合物;

可结合质谱或Western blot进行分析。

5. 脂质体或纳米系统修饰与示踪

可将Biotin-AA掺入脂质体或纳米颗粒中,通过生物素-链霉亲和素识别系统,实现靶向性研究和成像监测。

 

六、典型应用实验举例

应用 实验说明

膜插入实验 将Biotin-AA与细胞孵育,后用荧光标记的链霉亲和素显影,观察AA定位分布

脂酶活性分析 作为COX-2的生物素化底物,通过亲和素-HRP显色体系检测代谢速率

Pull-down实验 与细胞裂解液混合,结合亲和素磁珠捕获AA结合蛋白,后续分析其组成

生物素化脂质体研究 Biotin-AA修饰脂质体,结合荧光链霉亲和素观察其细胞摄取与靶向能力

ELISA替代实验 将Biotin-AA作为包被分子,通过抗体或蛋白与其结合后分析结合能力

 

七、使用建议

用途 推荐浓度

细胞孵育/成像 1–10 µM

酶活反应体系 0.1–2 µM(可根据底物酶Km调整)

拉下实验(pull-down) 1–5 µg/mL,用链霉亲和素珠捕获

纳米材料修饰 建议与其他磷脂共同使用,Biotin-AA比例控制在0.5–5 mol%

注意事项:操作时尽量在避光、低温环境中进行,避免脂肪酸氧化或水解。使用前可先用DMSO或乙醇预溶解,后再稀释至缓冲液中。

 

八、产品优势总结

优势 说明

双功能设计 同时具有脂类信号功能与生物素识别能力

可视化与捕获一体 可结合荧光/磁珠/HRP亲和素系统,实现检测、成像、拉下等多功能用途

高兼容性 适用于细胞实验、脂酶分析、纳米药物开发、分子生物学研究等多个领域

定制化可拓展 可提供不同长度linker版本(如PEG4、PEG12等),或与其他荧光团共标记版本(如Biotin-FITC-AA)

 

九、未来应用前景

随着脂质代谢在炎症、肿瘤、代谢性疾病等研究中的深入,Biotin-arachidonic acid 的多功能性将赋予其更广泛的科研价值:

疾病标志物的靶向检测

脂类信号通路机制研究

AA结合蛋白组学研究

纳米药物靶向传递平台设计

脂类药物筛选与抑制剂评价模型构建

 

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