FITC-ConA，荧光素-刀豆球蛋白A的反应机制

FITC 标记 ConA 的过程属于经典的蛋白质荧光标记反应，机制如下：

亲核取代反应：FITC 的异硫氰酸酯基团（-N=C=S）具有强亲电性，可与 ConA 多肽链中赖氨酸（Lys）残基的 ε- 氨基（-NH₂）发生亲核加成，生成硫脲键（-N-C-S-），反应式为：

₂

该反应在弱碱性条件（pH 8.0-9.0）下效率最高，通过调节 FITC 与 ConA 的摩尔比（通常 10:1-20:1）可控制标记密度，避免过度标记导致 ConA 构象改变。

反应条件优化：

缓冲体系：常用碳酸盐 - 碳酸氢盐缓冲液（pH 9.0），避免含氨基的缓冲剂（如 Tris）干扰反应；

温度与时间：4℃避光反应 12-16 小时，或室温反应 2-4 小时，通过透析或凝胶过滤除去未结合的 FITC；

标记率检测：通过紫外 - 可见光谱计算 FITC 与 ConA 的结合比例（通常每分子 ConA 结合 1-3 个 FITC 分子），确保活性保留。

三、ConA 与糖分子的结合反应机制

FITC-ConA 的核心功能源于 ConA 的糖识别特性，其作用机制如下：

特异性结合位点：ConA 的糖结合位点包含一个由天冬酰胺（Asn）、组氨酸（His）和酪氨酸（Tyr）组成的保守结构域，通过氢键与糖分子的羟基（-OH）相互作用。例如，与 α- 甘露糖结合时，ConA 的 Asn-214 的酰胺基与糖的 C3、C4 羟基形成氢键，His-107 的咪唑基与 C2 羟基作用，形成稳定的复合物。

四聚体协同效应：ConA 的四聚体结构使其可同时结合多个糖分子，产生协同效应。当靶标分子（如糖蛋白、糖脂）含多个 α- 甘露糖 / 葡萄糖残基时，FITC-ConA 可通过多价结合增强亲和力，例如与细胞膜表面糖萼中的糖链交联，形成荧光标记的聚集体，便于显微成像。

钙离子（Ca²⁺）与锰离子（Mn²⁺）依赖性：ConA 的糖结合活性依赖于金属离子辅助 —— 每个亚基含一个 Ca²⁺结合位点和一个 Mn²⁺结合位点，二者通过稳定糖结合结构域的构象维持活性。实验中需在缓冲液中添加 1-5 mM CaCl₂和 MnCl₂，以确保结合效率。

产品名称：FITC-ConA，荧光素-刀豆球蛋白A

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

齐岳生物供应各种荧光染料，包括CY系列、FITC、Rhodamine、Bodipy系列染料、Coumairn 染料、Dansyl染料、FAM/5-TAMRA、NBD、ICG及IR系列、ATTO系列染料、AMCA、Perylene、碘化物、DIR/DIL/DIO/DID/DAPI细胞膜染料等等，提供各种荧光（CY系列、FITC、香豆素、罗丹明等）荧光染料标记的定制服务

推荐产品：

花青染料标记Rifampicin

辣根过氧化物酶-醛基

HRP-CHO、醛基-辣根过氧化物酶

HRP-Alkyne炔基

Alkyne-HRP

辣根过氧化物酶-炔基

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.05.23