中文名:Atto 425-N-羟基琥珀酰亚胺酯
类别:荧光染料活性酯
分子特征:Atto 425是一种蓝光激发的荧光染料,带有NHS(N-hydroxysuccinimide)活性酯,可与胺基(如蛋白质、抗体、肽链中的赖氨酸残基)发生共价结合。
化学性质
Atto 425 NHS Ester 结构中含有NHS活性酯基团,能在温和条件下特异性地与初级胺反应,形成稳定的酰胺键。这种化学修饰方式广泛用于标记蛋白质、多肽和其他含氨基的生物分子。
Atto 425染料具有高量子产率、优良的光稳定性和亮度,适用于多种荧光检测技术。
应用范围
蛋白质和抗体标记:通过NHS酯与蛋白质赖氨酸残基的胺基共价结合,制备荧光标记抗体。
细胞成像:标记细胞表面蛋白或细胞内蛋白,进行荧光显微镜观察。
流式细胞术:用作荧光探针,分析细胞群体。
免疫荧光分析:提高检测灵敏度和信号特异性。
分子相互作用研究:作为示踪剂用于结合动力学和空间分布研究。
五、使用注意事项
该试剂对水分敏感,保存应避光、干燥,低温冷藏。
标记反应需在碱性缓冲液(pH约7.5-8.5)中进行,以保证胺基的活性。
标记完成后,需及时去除未反应的游离染料,以减少背景信号。
在活细胞标记时应注意细胞毒性和染料浓度的优化。
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