CY3-R8，CY3标记多阳离子穿膜肽的反应步骤

R8是一种由八个精氨酸组成的多阳离子穿膜肽，用于分子运输和细胞穿透研究。Cy3-R8则是通过共价标记Cy3染料于R8肽链上制备的荧光标记肽，常用于荧光成像和输送系统构建。

Cy3标记R8的详细反应步骤如下：

原料准备

合成纯化的R8肽，通常在5’或N端带有氨基修饰，作为Cy3-NHS酯的反应位点。

Cy3染料以活性NHS酯形式准备，溶解于DMSO或其他适宜溶剂中。

溶液配置

将R8肽溶解于适宜的缓冲液中，如碳酸盐缓冲液（pH 8.0-8.5），保证氨基的亲核活性。

调节肽浓度一般在0.5-2 mg/mL范围。

混合反应

以Cy3-NHS酯对R8肽的摩尔比一般设为1.2:1至2:1，确保标记效率。

缓慢将Cy3-NHS酯溶液加入肽溶液中，避免剧烈搅拌产生聚集。

反应条件控制

在室温或4℃下避光反应1-3小时，避免Cy3染料光降解。

pH维持在8.0-8.5，促进酰胺键形成，同时保护肽链结构。

反应终止

反应结束后，加入Tris缓冲液或其他含胺缓冲液，终止未反应的NHS酯，防止后续非特异反应。

纯化步骤

通过透析、凝胶过滤色谱或高效液相色谱（HPLC）去除游离染料和反应副产物。

收集纯化产物，冻干保存。

产物鉴定

通过紫外-可见光谱确认Cy3吸收峰，荧光光谱测定发射性能。

质谱和SDS-PAGE分析确认标记的分子量及纯度。

储存与使用

标记产物避光冷藏（4℃或-20℃）保存，防止荧光淬灭。

使用时溶解于缓冲液，保持pH中性或弱碱。

产品名称：CY3-R8

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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