AF488 Acid，即 Alexa Fluor 488羧酸，是Thermo Fisher Scientific公司开发的Alexa Fluor系列荧光染料中的重要成员之一。该染料具有明亮、稳定的绿色荧光，是分子和细胞生物学研究中广泛使用的标记工具。其带有羧酸（-COOH）官能团，为化学修饰与偶联提供了便利，是制作多种荧光探针、标记蛋白质、抗体及其他生物大分子的前体。

Alexa Fluor 488是FITC的替代品，具有更高的光稳定性和荧光强度，适合长时间高强度的荧光成像和多色荧光分析。

名称：AlexaFluor488羧酸

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

供应：西安齐岳生物科技有限公司

偶联机制及应用

AF488 Acid本身带羧酸基团，不能直接与靶分子共价结合，通常需经活化处理：

活化方法
使用EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺）和NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）共同活化羧酸基团，生成高活性的NHS酯形式（AF488 NHS Ester），随后与蛋白质、抗体等含氨基的生物大分子偶联。

偶联反应
NHS酯与伯胺基团发生亲核攻击，形成稳定的酰胺键，实现染料与生物分子的共价连接。

反应条件
pH 7.4–8.5的缓冲液中，常温反应30分钟至1小时，避光操作。

主要应用

蛋白质和抗体标记
利用AF488 NHS Ester标记蛋白质和抗体，用于免疫荧光染色、Western blot、免疫组化和流式细胞术。

核酸标记
与含氨基修饰的寡核苷酸偶联，制备高灵敏度的荧光探针，应用于原位杂交、荧光PCR等。

细胞和组织成像
适合共聚焦显微镜、多色荧光成像，定位细胞内蛋白质、胞器及分子动力学研究。

多色荧光分析
由于光谱特性与其他Alexa Fluor染料互补，常与Alexa Fluor 555、647等染料组合，实现复杂样本的多参数分析。

生物传感器开发
构建基于荧光共振能量转移（FRET）和酶活性检测的传感器。

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