CY3-耐碱性蛋白A,CY3-r-ATPA的合成及纯化过程
产品名称:CY3-耐碱性蛋白A,CY3-r-ATPA
纯度:95%+
CY3-耐碱性蛋白A(r-ATPA)是将荧光染料CY3共价标记于重组耐碱性蛋白A分子上的荧光蛋白。耐碱性蛋白A为蛋白A的一种变体,具备在较高pH条件下稳定存在的特性,蛋白分子富含赖氨酸等氨基酸残基,便于进行化学偶联。
合成过程中,常利用CY3-NHS酯与r-ATPA分子表面的赖氨酸侧链ε-氨基发生酰胺化反应。反应在pH 7.5-8.5的缓冲液(如PBS或碳酸盐缓冲液)中进行,温和条件下保持蛋白构象完整。CY3-NHS酯作为亲电试剂,被蛋白氨基亲核进攻,形成稳定的酰胺键,实现共价标记。
反应体系中,染料与蛋白的摩尔比、反应时间和温度为影响偶联效率的关键参数,通常选用1:5至1:20的比例,反应时间约1至3小时,温度控制在室温或4°C。反应完成后,采用透析、凝胶过滤色谱或超滤装置去除游离染料,确保标记产物的纯净。
纯化后,使用紫外-可见光谱确认CY3染料的吸收峰,荧光光谱测定标记产物的发射特性。SDS-PAGE结合荧光扫描可用于检测蛋白的标记情况和纯度。圆二色谱(CD)分析用于验证蛋白构象的保留,保证标记过程中蛋白功能未受损。
CY3-r-ATPA兼具耐碱性蛋白A的稳定结合特性与CY3的高亮度荧光信号,适合于多种生物识别和成像应用。其合成与纯化过程简便高效,为构建荧光标记蛋白质工具提供可靠方法。
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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