Cyanine3-PEG-Protein A,CY3-聚乙二醇-蛋白A的反应条件
Cyanine3-PEG-Protein A是将荧光染料Cyanine3标记的聚乙二醇(PEG)链通过共价方式连接于蛋白A分子上的复合材料。其合成涉及多步反应,关键在于选择适宜的反应条件以保证蛋白A的功能性及染料的荧光活性。
首先,PEG链通常经过活化处理,常用的活性基团包括N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS酯)或马来酰亚胺(Mal),以实现与蛋白A上游离胺基或巯基的共价结合。活化PEG应在低温(4℃)和干燥环境下保存,防止水解失活。
蛋白A的溶液准备通常采用缓冲体系,如磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH控制在7.2至7.5之间,以维持蛋白的稳定构象和活性。反应体系需保持适度盐浓度,避免蛋白质变性或非特异性聚集。
偶联反应一般在室温或低温条件下进行,反应时间控制在数小时范围,避免过度反应导致蛋白质结构损伤。缓冲液中可适当添加保护剂如甘油或低浓度盐以稳定蛋白结构。
荧光染料CY3的引入多通过先将其与PEG连接形成活性中间体,再与蛋白A反应完成。此分步法有助于控制标记比例和避免染料直接作用于蛋白质活性位点。
反应结束后,通过透析、凝胶过滤或离心过滤器进行纯化,去除游离染料及未结合PEG。纯化产品的活性和荧光性质通过紫外-可见光谱、荧光光谱以及蛋白活性测定方法进行验证。
整体反应条件强调温和性和可控性,避免蛋白质的变性和染料的光漂白,同时确保高效偶联和产品均一性。这些条件为Cyanine3-PEG-Protein A的成功制备和后续生物学应用奠定基础。
产品名称:Cyanine3-PEG-Protein A
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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