常用名 CY3-NHS酯
英文名 Cyanine 3, SE
CAS号 146368-16-3
分子量 727.844
分子式 C35H41N3O10S2
Sulfo-Cyanine3-NHS 是一种水溶性、活性酯形式的荧光染料,属于 Cyanine(菁类)染料系列,其结构中包含两个磺酸基团(Sulfo group)增强水溶性,同时引入了 NHS 酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)用于高效、特异性地与胺基(如蛋白质或抗体上的 Lys 残基)发生共价反应。
它是 Cyanine3 染料的水溶性 NHS 酯衍生物,主要应用于生物分子标记、免疫染色、细胞成像、荧光探针构建等。由于其优异的光学性能和水相反应性,Sulfo-Cyanine3-NHS 成为现代生物技术与分子诊断实验中常用的荧光标记试剂之一。
分子结构与反应特性
1. 结构特征
Cyanine3 主骨架:属于三甲菁染料,具有高量子产率与强荧光信号。
两个磺酸基(–SO₃Na):提高了染料在水中的溶解度,适合水相标记反应。
NHS酯基团:为活性酯结构,可与蛋白质、抗体、多肽等分子上的胺基迅速形成共价酰胺键。
2. 反应机制
NHS酯与伯胺或仲胺在 pH 7.5–8.5 范围内反应,生成稳定的共价键。
反应快速、选择性高,广泛用于 抗体标记、蛋白探针构建 等生物连接场景。
应用领域
1. 蛋白质标记
Sulfo-Cyanine3-NHS 能特异性标记蛋白质表面氨基(特别是赖氨酸残基),实现:
荧光免疫检测(FACS、ELISA)
共聚焦显微成像
FRET 研究中的供体或受体标记
荧光西方印迹(Fluorescent Western Blot)
2. 抗体标记与诊断探针构建
常用于制备定量诊断用抗体探针,如流式抗体、免疫组化染色探针等。
可提供稳定、明亮、背景干扰低的信号。
3. 核酸标记
与修饰引物、探针或寡核苷酸的氨基发生偶联,用于 qPCR、原位杂交(FISH)、微阵列芯片等。
4. 纳米材料功能化
对金纳米粒子、量子点、脂质体、聚合物粒子表面引入胺基后可与 Sulfo-Cyanine3-NHS 偶联,赋予荧光特性。
5. 细胞标记与追踪
在细胞表面蛋白氨基的修饰条件下可进行荧光标记,尤其适合活细胞标记(需避免对生理活性的影响)。
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