英文名称: AF 555 NHS
MF: C44H62N4O16S4
MW: 1031.23
CAS: 407627-69-4
AF 555 NHS ester 是一种高性能荧光染料的活性酯形式。其化学活性源于NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester)基团,可与含氨基的生物分子(如蛋白质、肽或寡核苷酸)发生共价偶联。作为三乙胺盐形式(triethylammonium salt),AF 555 NHS ester具有良好的溶解性和稳定性,广泛应用于生物标记、荧光成像、FRET体系、细胞和分子检测等研究领域。
应用领域
1. 蛋白质和多肽标记
AF 555 NHS ester可用于标记抗体、多肽或其他蛋白质,以构建荧光标记抗体用于免疫荧光实验、流式细胞术、免疫印迹(Western blot)等。标记后可通过荧光显微镜直接检测目标蛋白的定位和表达水平。
2. 核酸探针标记
通过将AF 555 NHS ester与氨基修饰的寡核苷酸偶联,可制备荧光探针,用于原位杂交(FISH)、qPCR探针或核酸检测,具有高灵敏度和低背景信号。
3. FRET体系构建
AF 555 常用作FRET供体染料,与远红或近红外染料(如Alexa Fluor 647、Cy5)配对,通过荧光能量转移研究蛋白质相互作用、酶切活性及分子动力学。
4. 细胞成像与活体探针
由于其激发光在绿色–橙色区域,AF 555可以进行活细胞染色、膜蛋白标记或胞内组分追踪。其高亮度和低光漂白率使其适用于长时间动态成像。
5. 多重荧光分析
可与其他不同波长的Alexa Fluor染料组合,实现多重荧光检测,适用于高通量检测和多靶标研究。
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