常用名 N-(3-叠氮丙基)生物素胺
英文名 Biotin-azide
CAS号 908007-17-0
分子量 326.41800
分子式 C13H22N6O2S
熔点 168 °C
Biotin-Azide是一种功能化生物素衍生物,化学上由生物素分子与叠氮(azide, –N₃)基团通过适当的连接臂连接而成。
Biotin-Azide结合了生物素的高亲和力特性和叠氮基团的“点击化学”活性,使其在生物标记、蛋白质和核酸修饰、分子成像、化学生物学及生物传感器构建等领域具有广泛应用。
化学反应与偶联能力
1. 点击化学偶联(Click Chemistry)
Biotin-Azide的叠氮基团能在Cu(I)催化条件下与炔基修饰的分子(蛋白质、核酸、糖、脂质、聚合物等)发生高效、特异的共价偶联反应,生成稳定的1,2,3-三唑环。这一反应条件温和,通常在水或含有有机溶剂的缓冲液中即可进行,不影响生物分子的结构和活性。
2. 非共价捕获
偶联后的生物素部分可以与亲和素或凝集素结合,常用于以下应用:
蛋白质纯化与富集
生物分子检测(ELISA、Western blot、Pull-down assay)
纳米粒子或材料表面修饰
3. 多功能化
Biotin-Azide可用于多步标记策略,例如先通过点击化学将目标分子连接到Biotin-Azide,再利用生物素-亲和素系统进行荧光标记、固定或信号放大。
应用领域
蛋白质修饰与检测
通过点击化学将Biotin-Azide标记到蛋白质上,再利用亲和素-荧光染料复合物进行检测,可实现高灵敏度蛋白定位、定量或交互作用分析。
核酸标记
Biotin-Azide可用于标记炔基修饰的DNA或RNA,通过生物素-亲和素结合实现核酸捕获、富集或荧光成像,适用于qPCR探针、FISH或ChIP实验。
糖化与代谢标记
在糖代谢标记实验中,细胞摄入的炔基糖可以通过点击化学与Biotin-Azide偶联,实现糖蛋白或糖脂的富集与分析。
生物传感器与纳米材料修饰
Biotin-Azide可用于功能化纳米粒子、微球或聚合物,通过生物素-亲和素系统构建高亲和力传感器或荧光标记平台。
活体成像与分子探针构建
在某些活体实验中,Biotin-Azide通过点击化学标记生物分子后,可结合荧光或放射性亲和素探针进行高灵敏度成像。
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