Cy5.5-Deoxycholic Acid,CY5.5标记去氧胆酸的化学反应原理
去氧胆酸(Deoxycholic Acid,DCA)是一种具有甾体骨架的二级胆汁酸,含有羧基和多个羟基官能团,具有良好的生物相容性和脂质亲和性。Cy5.5染料是一种常用的近红外荧光染料,含有活化的N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS酯)基团,能与含有游离氨基的分子发生酰胺键形成反应。将Cy5.5标记去氧胆酸通常利用该酰胺化反应实现共价连接,制备具有荧光功能的胆酸衍生物。
化学反应原理
反应底物和活化剂
去氧胆酸分子末端含有一个羧基(–COOH),该羧基是反应的主要活性位点。Cy5.5染料通常以NHS酯形式存在,NHS酯为活化的羧酸衍生物,具有良好的亲电性,易被亲核性氨基攻击。
酰胺键形成的机理
去氧胆酸的羧基需先被活化,若直接与Cy5.5-NHS酯反应,效率有限,因此常借助水溶性碳二亚胺类活化剂(如EDC,1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)与NHS配合,形成去氧胆酸的NHS活化酯。
具体步骤为:
EDC活化羧基,形成O-酰基异脲中间体;
NHS捕获该中间体生成稳定的NHS酯;
Cy5.5染料中含有游离氨基(如Cy5.5-NH2),其氨基对NHS酯碳原子进行亲核攻击;
NHS离去,氨基与羧基形成稳定的酰胺键,实现共价连接。
选择性和温和条件
该反应在温和的缓冲条件(pH约7.0–8.5)下进行,避免破坏Cy5.5染料的共轭体系和去氧胆酸的甾体结构,保证标记产物的结构完整和功能活性。
反应动力学
NHS酯与氨基的亲核加成反应快速且高效,反应时间一般为数小时至过夜。通过调节反应物浓度、pH和温度,可优化产物得率和标记密度。
副反应控制
反应体系中需避免水分过多导致NHS酯水解,且防止Cy5.5染料自身聚集或降解。通常在无水或微水条件下操作,并用惰性气氛保护。
产物稳定性
形成的酰胺键化学稳定,耐水解和酶解,保证Cy5.5-Deoxycholic Acid在生物环境中的持久荧光信号和功能表现。
产品名称:Cy5.5-Deoxycholic Acid,CY5.5标记去氧胆酸
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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