英文名 TFAX 488, SE
CAS号 222164-96-7
分子量 659.453
分子式 C25H15N3O13S2Li2
AF488 NHS ester 是一种绿色荧光染料 Alexa Fluor 488 的活性酯形式,广泛用于蛋白质、肽、多肽和抗体的荧光标记。其 NHS 酯官能团(N-hydroxysuccinimide ester)可与分子中的氨基(–NH₂)反应,形成稳定的酰胺键,实现高效共价标记。AF488 以其高亮度、抗光漂白性和良好的水溶性成为荧光成像、流式细胞分析和分子探针研究中的首选染料。
化学性质
AF488 NHS ester 的分子结构稳定,吸收峰约为 495 nm,发射峰约为 519 nm,发射光为明亮绿色荧光。NHS 酯提供了高反应性,可在生理 pH 条件下与氨基形成共价键。其水溶性设计允许在水性缓冲液中直接使用,减少对生物分子的干扰。染料本身具有高度抗光漂白性能,可在长时间成像实验中保持荧光强度。
功能特点
高荧光亮度:提供强烈绿色荧光,便于显微成像和流式检测。
抗光漂白性强:可承受长时间激发光照射,适合连续观察实验。
NHS 酯末端高反应性:可与氨基结合形成稳定的共价标记。
水溶性良好:在水性缓冲液中稳定分散,便于生物体系使用。
广泛应用:适用于蛋白质、抗体、多肽、核酸及其他生物分子的标记。
实验应用
AF488 NHS ester 广泛应用于生物荧光标记和成像研究。例如,在抗体标记中,可将 NHS ester 与抗体的赖氨酸残基反应,生成稳定的荧光标记抗体,用于免疫荧光成像、流式细胞术和免疫组化。在蛋白质相互作用研究中,标记蛋白可作为 FRET 探针的供体荧光染料,配合荧光淬灭剂进行能量转移实验。此外,该染料在活细胞成像、细胞膜标记、荧光原位杂交(FISH)及微流控检测中也有广泛应用。
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