产品名称：Sulfo Cy5-N3，磺化Cy5-叠氮的标记原理与制备

Sulfo-Cy5-N3的标记原理与制备

1. 标记原理

反应基团：Sulfo-Cy5-N3的分子结构中，叠氮基团作为“生物正交反应模块”，Sulfo-Cy5作为“荧光报告模块”。使用时，叠氮基团与目标分子（如DBCO修饰的抗体、炔烃修饰的纳米载体）通过点击化学反应共价结合，Sulfo-Cy5提供近红外荧光信号。

反应条件：

SPAAC反应（无铜）：在水相缓冲液（如PBS，pH 7.0-7.5）中进行，室温避光反应1-2小时，适用于对铜敏感的生物分子（如活细胞、体内实验）。

CuAAC反应（铜催化）：需添加铜催化剂（如CuSO₄/TBTA）和还原剂（如抗坏血酸钠），反应条件稍复杂，但反应速率更快，适用于体外实验。

2. 制备关键点

Sulfo-Cy5与叠氮基团的连接：Sulfo-Cy5的活性形式（如Sulfo-Cy5-NHS酯）可与叠氮化物修饰的胺（如叠氮乙胺）反应，生成稳定的酰胺键。反应需在弱碱性条件（pH 8.5-9.5）下进行，室温避光反应2-4小时。

纯化步骤：通过透析（截留分子量1kDa）或凝胶过滤（如Sephadex G-25）去除未反应的Sulfo-Cy5或叠氮化物，确保产物纯度。

活性验证：标记后需检测Sulfo-Cy5的荧光特性（如发射波长、亮度）和叠氮基团的点击反应活性（如与DBCO修饰的BSA反应效率），确保两者功能均保留。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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