产品名称:HSA-PEG-DMG,人血清白蛋白-聚乙二醇-二肉豆蔻酰-sn-甘油的合成方法
合成方法概述
DMG-PEG的制备:
酯键连接:
将DMG-sn-甘油的3-羟基与甲氧基PEG(mPEG)的羧基端(通过琥珀酸酐修饰引入)在EDC/NHS活化下缩合。
反应条件:
pH 7.4,室温反应12-24小时,产率>80%。
醚键连接:
通过威廉姆森合成法,将DMG的3-羟基转化为溴代物,与PEG的羟基端在碱性条件下(如K₂CO₃/DMF)反应。
HSA-PEG-DMG的偶联:
方法一:共价修饰:
将DMG-PEG的末端羧基与HSA的赖氨酸残基(ε-氨基)通过EDC/NHS活化缩合。
关键参数:
HSA:DMG-PEG摩尔比=1:10,pH 8.0,4°C反应24小时,修饰度达5-8个PEG/HSA。
方法二:非共价自组装:
利用HSA的疏水结合位点,直接混合HSA与DMG-PEG,通过疏水相互作用形成复合物。
优势:
避免化学修饰对HSA结构的破坏,保留其天然活性。
纯化与表征:
纯化:
通过超滤(截留分子量100 kDa)或凝胶过滤(Superdex 200)去除未反应试剂。
表征:
SDS-PAGE:验证HSA的完整性(单一条带,无降解)。
MALDI-TOF MS:测定PEG修饰数量(分子量增加约2-5 kDa/PEG)。
DLS:测定纳米颗粒的粒径(80-150 nm)和Zeta电位(-20至-30 mV)。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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