AF488 标记链霉亲和素偶联物是由高亲和力蛋白 链霉亲和素(Streptavidin) 与绿色荧光染料 Alexa Fluor 488(AF488) 通过共价方式偶联得到的荧光探针。链霉亲和素来源于 Streptomyces avidinii,是一种四聚体蛋白,每个亚基可结合一个生物素分子(biotin),因而整体具有极高的亲和能力(Kd ≈ 10⁻¹⁵ M),几乎为不可逆结合。这种特性使其成为生物素化分子检测与信号放大的核心工具。当其与 AF488 偶联后,既保留了对生物素的高亲和力,又具备明亮稳定的绿色荧光信号(激发峰约 495 nm,发射峰约 519 nm)。
化学性质上,AF488 通过活性 NHS 酯或其他偶联化学方法与链霉亲和素中的赖氨酸氨基结合,生成稳定酰胺键。偶联反应过程中控制荧光基团与蛋白的比例(degree of labeling, DOL)至关重要,既要保证蛋白活性不受影响,又要获得足够明亮的荧光。所得产物水溶性良好、稳定性高,能在复杂生物样品环境中保持低背景信号和高信噪比。
应用方面,AF488-链霉亲和素广泛用于检测、定位和定量生物素化分子。例如:
免疫荧光成像(IF):用于识别生物素化一抗或生物素化探针,实现高灵敏度信号放大;
免疫印迹(WB):结合生物素化探针检测特定蛋白;
流式细胞术(FACS):检测细胞表面或胞内生物素化分子;
原位杂交(ISH/FISH):用于检测生物素标记核酸探针;
名称:AF488 标记链霉亲和素偶联物是由高亲和力蛋白
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
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