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Phalloidin-CY5.5,鬼笔环肽-CY5.5荧光标记定制合成技术
发布时间:2025-08-20     作者:zhn   分享到:

Phalloidin-CY5.5 定制合成技术

中文名称:鬼笔环肽-CY5.5
英文名称:Phalloidin-CY5.5

 

一、分子设计原理

Phalloidin(鬼笔环肽)是一种从毒鹅膏菌(Amanita phalloides)中分离出的七肽毒素,其核心特性是能够高亲和力、不可逆地结合F-肌动蛋白(F-actin),从而在细胞生物学中被广泛用作肌动蛋白细胞骨架的高特异性探针。为了实现荧光成像功能,Phalloidin常与荧光染料进行共价修饰,形成不同波段的荧光探针。

CY5.5是一种近红外荧光染料,发射波长约为694 nm,能够避免细胞和组织的自发荧光干扰,具有组织穿透力强、背景噪声低的优势。将CY5.5与Phalloidin偶联,可以在活体或固定细胞中对F-肌动蛋白网络进行深层成像,并在多重荧光实验中与其他可见光波段的荧光探针区分开来。

因此,Phalloidin-CY5.5的设计原理在于利用鬼笔环肽的高选择性结合能力和CY5.5的近红外成像特性,构建一种高灵敏度、高穿透力的细胞骨架荧光探针。

 

二、定制合成技术路线

Phalloidin的活性基团修饰

Phalloidin分子中天然氨基或羟基基团可作为修饰位点。

通过引入氨基或羧基活性基团,为后续与CY5.5的偶联提供反应位点。

荧光染料CY5.5的活化

常用CY5.5-NHS ester(琥珀酰亚胺酯)作为活化形式。

该活化酯能够与Phalloidin上的氨基发生高效酰胺键偶联,确保荧光基团稳定连接。

偶联反应

在缓冲液体系(pH 7.5–8.5)中,Phalloidin与CY5.5-NHS ester进行共价反应。

反应条件需控制温度(通常为室温),以保证结构稳定性。

纯化步骤

采用高效液相色谱(HPLC)分离目标产物与未反应的游离染料。

通过质谱与核磁共振分析确认产物结构。

冻干与保存

将纯化后的Phalloidin-CY5.5进行冻干,获得稳定粉末形式。

保存条件通常为-20℃避光,以保持荧光活性。

 

三、关键工艺要点

位点选择:Phalloidin的修饰位点必须避免影响其与F-肌动蛋白的结合活性。

偶联效率:CY5.5的活性酯在水溶液中极易水解,因此必须快速反应并优化摩尔比。

纯度控制:确保未结合的游离CY5.5完全去除,避免成像背景干扰。

稳定性验证:通过光稳定性与结合实验测试其在细胞固定及成像中的稳定性。

 

四、技术优势与性能

高特异性:Phalloidin分子确保对F-肌动蛋白的不可逆结合,荧光信号高度集中。

近红外成像优势:CY5.5的长波长发射减少组织自发荧光,信噪比高。

深层组织穿透:适用于活体动物成像及厚切片组织的深层观测。

定制化灵活性:可根据用户需求调整连接位点、荧光强度或修饰方式,实现多波段标记。

实验兼容性强:可与多种固定和透化方法兼容,适合免疫荧光染色及共聚焦显微镜成像。 

产地:西安齐岳生物

用途:科研

以上资料由西安齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研  

Phalloidin-CY5.5

运输说明:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。

低温产品:低温产品运输过程中加装专用冰袋运输。

常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。


关于我们:

西安齐岳生物专注于纳米载体的研发与定制服务,提供多种类型的纳米递送系统,包括脂质体、纳米囊泡、聚合物纳米粒及膜仿生纳米载体等。公司可根据客户需求实现药物、蛋白、核酸及光敏剂等负载,支持靶向修饰、响应性控释及表面功能化。齐岳生物在材料选择、粒径控制、表面修饰及负载效率方面具有丰富经验,可为科研和临床前研究提供高质量、个性化的纳米载体解决方案,旨在提升药物递送效率、靶向性及生物安全性,为精准治疗和多模态诊疗提供有力支持。

 

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