Cy5-Bortezomib，CY5标记硼替佐米的反应机制

硼替佐米（Bortezomib）是一种可逆性蛋白酶体抑制剂，其核心结构为 二肽硼酸酯，分子量约384 Da。硼替佐米通过与26S蛋白酶体的β5亚基活性位点中的N-末端苏氨酸残基相结合，形成可逆性的 硼酸酯键，从而抑制其胰凝乳样活性。这一作用阻断了泛素-蛋白酶体途径中蛋白质的降解，进而导致细胞周期停滞。

当硼替佐米与Cyanine 5（Cy5）荧光团偶联后，得到的Cy5-Bortezomib分子不仅保留了药物的活性部分（硼酸基团），还引入了强荧光信号用于示踪。Cy5通常通过其 NHS酯 与硼替佐米分子中的氨基（如二肽部分的末端氨基）形成酰胺键，确保硼酸酯基团不受破坏，以维持对蛋白酶体的特异性抑制。

反应机制具体表现如下：

蛋白酶体结合与可逆抑制

Cy5-Bortezomib进入细胞后，依靠硼替佐米部分的二肽结构与26S蛋白酶体的β5亚基特异性识别。其硼酸基团与苏氨酸羟基发生亲核加成反应，形成四面体中间体的 可逆硼酸酯键。该过程阻断了底物肽键水解所需的亲核攻击，导致蛋白水解功能受抑。

电子效应与稳定性

硼酸基团作为电子缺陷中心，能够与羟基形成强的配位键。反应过程中，β5亚基苏氨酸羟基作为亲核试剂攻击硼原子，形成 B–O共价键，从而稳定中间体结构。由于该配位键的可逆性，当外源小分子或环境条件变化时，硼替佐米仍可解离。Cy5修饰部分不会参与该配位过程，因此不影响关键的抑制机制。

药物-探针双功能特性

Cy5部分提供远红区荧光性质，能够在650/670 nm波段发射信号，用于实时追踪分子在细胞内的位置和结合动力学。通过荧光显微镜或流式细胞术，可以观察Cy5-Bortezomib进入细胞后的分布，结合蛋白酶体的程度，以及抑制作用与细胞凋亡的相关性。

共价修饰与动力学特征

Cy5-Bortezomib与蛋白酶体的结合属于快速、可逆的共价修饰过程，其抑制动力学通常表现为时间依赖性。初始结合迅速形成中间体，随后达到稳态平衡。解离速率较慢，因此其抑制作用持久。荧光示踪有助于分析结合速率常数（kon、koff），并与未标记的硼替佐米进行比较。

整体反应路径总结

步骤1：Cy5-Bortezomib扩散进入细胞；

步骤2：二肽骨架定位到蛋白酶体活性口袋；

步骤3：硼酸基团接受苏氨酸羟基的亲核攻击，形成可逆硼酸酯中间体；

步骤4：蛋白水解被阻断，底物蛋白积累；

步骤5：Cy5荧光信号作为报告工具，实时反映药物结合与抑制状态。

产品名称：Cy5-Bortezomib，CY5标记硼替佐米

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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