CY5-Dextrhai，CY5标记葡聚糖的反应步骤

Cy5标记的葡聚糖（Cy5-Dextran）是一类典型的荧光多糖探针，其制备过程依赖于将含有活性基团的Cy5染料与葡聚糖分子链上的羟基或改性位点发生偶联反应。整个反应步骤主要包括：载体多糖的预修饰、染料活化与耦合反应、纯化及表征等几个关键环节。

首先是葡聚糖的预处理步骤。天然葡聚糖分子具有大量伯羟基和次羟基，但其反应活性相对较弱，因此通常需要通过化学方法引入活性基团，例如在碱性条件下与氯乙酸反应生成羧甲基葡聚糖（CM-dextran），或采用氰基溴化物（CNBr）活化葡聚糖骨架以引入氨基位点。这些改性步骤为后续的染料接枝提供了亲核反应位点。

其次是Cy5染料的活化过程。常用的Cy5-NHS ester或Cy5-COOH在化学合成中具有较强的反应性，其中Cy5-NHS ester可与氨基发生高效的酰胺化反应，而Cy5-COOH则需借助EDC/NHS体系活化后才能与羟基或氨基结合。反应通常在pH 7.5–8.5的缓冲体系中进行，以保证氨基的亲核性，同时避免Cy5染料的降解。

第三步是偶联反应的实施。将修饰过的葡聚糖溶解于PBS或碳酸盐缓冲液中，缓慢加入Cy5-NHS ester溶液，在温和搅拌下反应2–12小时。反应的摩尔比需要严格控制，通常葡聚糖上的可反应位点与Cy5摩尔比保持在1:5至1:20之间，以保证既能得到足够的荧光信号，又避免过度标记导致溶解性下降或空间构象破坏。

完成反应后，需要进行纯化步骤以去除未反应的游离Cy5。常用的纯化方法包括透析（MWCO 3–10 kDa）、凝胶过滤层析（如Sephadex G-25）或超滤技术。这些方法能够有效分离大分子标记产物与小分子杂质。纯化后产物通常呈深紫红色或蓝紫色荧光特征，可在650 nm激发、670 nm发射波长下检测。

后是表征与验证。通过紫外-可见吸收光谱和荧光光谱检测标记成功与否；通过核磁共振（NMR）或傅里叶红外光谱（FTIR）确认葡聚糖骨架未被破坏；通过动态光散射（DLS）与凝胶渗透色谱（GPC）分析其分子量分布和聚集行为。标记度（Degree of Labeling, DOL）常通过吸光度比值计算，通常控制在每100个葡聚糖单元含1–5个Cy5分子为宜，以确保信号强度与溶解性之间的平衡。

综上，Cy5-Dextran的制备步骤通过“葡聚糖活化—Cy5偶联—纯化—表征”的流程实现，既保持了葡聚糖的亲水性与生物相容性，又引入了稳定的远红荧光特性，为其在细胞示踪、血管成像和药物递送体系中的应用奠定了基础。

产品名称：CY5-Dextrhai，CY5标记葡聚糖

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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