Cy5-Paeoniflorin,CY5标记芍药苷的纯化过程
芍药苷(Paeoniflorin)是一种单萜苷,分子结构中含多羟基、环状醚及糖苷部分,具有较强的亲水性和一定的化学活性。通过Cyanine 5(Cy5)标记形成Cy5-Paeoniflorin,可实现荧光示踪,用于生物体系研究、药物递送以及分子动力学实验。纯化与表征是确保标记成功和分子功能保留的关键步骤。
纯化过程
反应结束处理
Cy5-Paeoniflorin偶联反应完成后,体系中通常存在未反应的Cy5染料、溶剂和副产物。首先通过透析或凝胶过滤去除小分子游离染料,保留荧光标记的芍药苷分子。透析膜分子量截断一般选用500–1000 Da,以充分去除游离Cy5。
色谱纯化
高效液相色谱(HPLC):采用反相C18柱,流动相为水-乙腈梯度体系(含0.1%三氟乙酸或乙酸),可实现Cy5-Paeoniflorin与未反应芍药苷及其他副产物的分离。
柱层析:硅胶或反相凝胶柱用于粗分离,结合荧光检测,可直观确认目标产物位置。
回收与浓缩
纯化后的产物可通过减压旋转蒸发去除有机溶剂,再以适当缓冲液溶解,获得高纯度、稳定的Cy5-Paeoniflorin储备液。
表征方法
质谱(MS)
质谱可直接确认分子量增加是否与Cy5偶联匹配。Cy5-Paeoniflorin的质谱峰应显示芍药苷骨架加上Cy5分子量的质量,确保偶联成功。
核磁共振(NMR)
通过^1H NMR和^13C NMR分析,可验证芍药苷环和糖苷的完整性,同时观察Cy5信号峰,确认偶联位置及结构稳定性。
紫外-可见光谱(UV-Vis)
Cy5标记引入远红吸收峰(约650 nm),与芍药苷特征吸收(约230–280 nm)叠加。UV-Vis光谱可以评估标记效率及浓度。
荧光光谱
Cy5-Paeoniflorin的荧光峰(λ_em≈670 nm)用于验证荧光性质,同时可用于后续示踪实验的校准。
产品名称:Cy5-Paeoniflorin,CY5标记芍药苷
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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