Cyanine5-PEG-Thyroglobulin，CY5-聚乙二醇-葡萄球菌A蛋白的偶联化学机理

CY5-PEG-Thyroglobulin 是通过 PEG 连接臂将荧光染料 Cy5 偶联至甲状腺球蛋白（Thyroglobulin, Tg）表面的产物，其反应机制可分为偶联化学机理与蛋白结构兼容性两部分。

偶联化学机理

• 末端 Cy5-PEG 带活化官能团（如 NHS 酯或 maleimide），与 Tg 的赖氨酸 ε-NH2 或巯基反应。

• 在 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）体系中，PEG-NHS 与蛋白氨基生成稳定酰胺键；反应为亲核取代反应，赖氨酸胺进攻 NHS 酯碳原子，释放 N-羟基琥珀酰胺离子。

• 在 maleimide 体系中，蛋白自由巯基与 maleimide 双键发生 Michael 加成，形成稳定的硫醚键。

反应动力学与调控

• 偶联效率受 pH、温度及蛋白结构影响。NHS 酯反应佳 pH 7.2–8.0，maleimide 反应佳 pH 6.5–7.5。

• PEG 链长度和末端结构影响染料空间暴露与蛋白构象扰动。

• 通过调节 Cy5-PEG 当量，可控制标记度（DOL），以兼顾荧光强度与蛋白活性。

蛋白结构兼容性

• Tg 为二聚体或多聚体蛋白，结构复杂且富含糖基化位点。PEG 提供空间缓冲，减少荧光团与核心蛋白构象相互作用。

• 反应过程中保留蛋白折叠和二硫键网络，以保证生物活性和免疫原性稳定。

反应过程概述

• 蛋白溶解于缓冲体系（PBS pH 7.4），去除游离胺或巯基干扰物。

• 加入 Cy5-PEG-NHS 或 Cy5-PEG-maleimide，低温避光反应 1–4 小时。

• 用甘氨酸或乙醇胺终止剩余活性基团。

• 通过透析、超滤或凝胶过滤去除游离染料及小分子副产物。

反应机理特点

• 偶联为共价稳固键，保证 Cy5-PEG 与蛋白不可逆结合；

• PEG 链提供柔性隔离，使荧光团远离活性或受体结合位点；

• 反应可调控标记密度，兼顾光学性能与蛋白生物活性。

应用优势

• 可用于荧光追踪、蛋白-蛋白互作研究或载体表面修饰；

• 保持蛋白构象，适合体外和体内成像、免疫检测和药物递送研究。

产品名称：Cyanine5-PEG-Thyroglobulin，CY5-聚乙二醇-葡萄球菌A蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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