产品名称:DSPE-PEG-NH2,二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基的合成方法
合成方法
1. 核心结构合成
步骤一:DSPE-PEG中间体制备
DSPE活化:
DSPE的磷酸乙醇胺头基通过活化剂(如NHS和EDC)将羟基转化为活性酯。
与PEG偶联:
活化后的DSPE与氨基化PEG(NH₂-PEG)在弱碱性条件(pH 7-8)下发生酰胺化反应,形成DSPE-PEG中间体。
反应条件:无水DMF或DMSO溶剂,温度25-37℃,时间12-24小时。
纯化:
通过透析(MWCO 3.5 kDa)或凝胶渗透色谱(GPC)去除未反应的PEG,确保纯度>95%。
步骤二:NFkB蛋白偶联
化学偶联法:
蛋白活化:NFkB蛋白的氨基或巯基通过活化剂(如SMCC或Traut's reagent)转化为活性基团(如马来酰亚胺)。
偶联反应:DSPE-PEG的末端羧酸或巯基与活化后的NFkB蛋白在温和条件(如PBS缓冲液,pH 7.4)下反应,形成共价键。
反应条件:室温下搅拌6-12小时,添加催化剂(如三乙胺)促进反应。
纯化:
通过超滤(MWCO 30 kDa)或尺寸排阻色谱(SEC)去除未反应的蛋白或小分子副产物。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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