CY7.5-Arginine,CY7.5标记精氨酸的合成步骤
CY7.5-Arginine 是由近红外荧光染料CY7.5与氨基酸精氨酸偶联得到的荧光标记小分子,其设计思路是利用精氨酸分子上的伯胺基团与CY7.5衍生物(常为NHS酯或活性酯形式)发生酰胺化反应,从而将染料稳定地引入小分子骨架。该化合物兼具精氨酸的碱性胍基侧链特性与CY7.5的强近红外吸收和发射特征,因而在荧光探针和分子标记研究中具有重要价值。其合成步骤主要分为以下几个环节:
第一步是 原料准备。精氨酸作为氨基酸,其分子含有一个α-氨基、一个羧基以及一个胍基侧链,通常在偶联前需要通过保护策略区分不同反应位点。常见方法是将羧基进行酯化保护(如甲酯),以避免其在缩合反应中与活性酯交叉反应。同时,胍基通常无需特殊保护,因为在合成条件下反应活性较低,主要反应位点为α-氨基。另一方面,CY7.5通常使用 CY7.5-NHS ester 或 CY7.5-COOH与EDC/NHS活化的形式,以确保其能够高效与氨基发生酰胺键连接。
第二步是 偶联反应。将CY7.5-NHS酯溶于无水DMSO或DMF中,加入精氨酸溶液(可在弱碱性条件下,如pH 8.0缓冲液),在室温或略低温度下搅拌数小时。由于精氨酸的α-氨基在碱性条件下去质子化,成为高亲核性的反应中心,可以高效攻击活性酯碳酰基,从而生成稳定的酰胺键。此过程需要控制摩尔比,通常CY7.5与精氨酸以1:1或略过量的染料为宜,以确保反应的完全性。
第三步是 反应终止与初步纯化。反应完成后,可通过透析或反相色谱去除未反应的游离染料与副产物。常用的方法是采用HPLC进行纯化,以分离目标产物CY7.5-Arginine与可能存在的多种异构体或未完全反应物。
第四步是 结构验证与表征。纯化后的产物通过紫外-可见光谱(UV-Vis)确认染料的吸收峰(通常在780–800 nm),通过荧光光谱验证其发射峰(约810–820 nm),并结合质谱(ESI-MS或MALDI-TOF)确认其分子量。此外,还可使用NMR检测精氨酸的胍基信号,进一步证明氨基与染料的偶联位置。
通过上述步骤,可以获得高纯度的CY7.5-Arginine。该产物不仅保持了精氨酸的亲水性与正电荷性质,还具有近红外荧光特性,因而在氨基酸代谢研究、分子探针开发以及生物分子标记实验中展现出重要应用潜力。
产品名称:CY7.5-Arginine,CY7.5标记精氨酸
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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