CY7.5-Isomaltose，CY7.5标记异麦芽糖的反应步骤

异麦芽糖为α-(1→6)连接的二葡萄糖，具有单一还原端，可在该端定向偶联以保持非还原端的空间识别特性。CY7.5 为近红外花菁染料（发射约800 nm），与糖类偶联后在水相中仍具高消光系数和良好光稳定性，适用于深层成像、荧光定量与表面构建。为提高水溶性与减少非特异吸附，常选用磺化CY7.5衍生物。通过“还原端改性→无铜应力点击（SPAAC）/或NHS酯酰胺化”两步法，可获得结构明确、取代度（DOL）可控的CY7.5-异麦芽糖。产物一般呈深蓝紫色固体，易溶于水、PBS，微量有机助溶剂（DMSO≤20%）可加速耦联。表征以UV-Vis（λ_max≈780–790 nm）、荧光谱（Em≈800 nm）、MALDI-TOF 或 ESI-MS、HPLC 纯度及酚-硫酸/PAHBAH 碳水化合物定量结合计算DOL。避光、−20 °C无水条件分装保存，避免反复冻融。

反应步骤（以“氨基化→NHS耦联”与“叠氮化→DBCO点击”两路线为例）

1）还原端氨基化（通用前处理）：异麦芽糖（50 mg）溶于0.1 M 醋酸钠缓冲液（pH 5.5，2–3 mL），加入乙二胺（或2-氨基乙醇胺）20–50 eq 与NaBH3CN 10–20 eq；37 °C 振荡过夜，进行还原胺化得到Isomaltose-NH2。用Sephadex G-10/G-25 或超滤（3 kDa）脱盐，冻干备用。

2A）与CY7.5-NHS偶联（酰胺化路线）：将Isomaltose-NH2 溶于PBS（pH 7.4，含10–20% DMSO），按糖:染料=1:1–1:3摩比，冰浴下缓慢加入CY7.5-NHS（现配，避光）；室温反应2–4 h。以0.1 M 乙醇胺（pH 8.5）封闭剩余活性酯（15 min）。凝胶层析或制备HPLC纯化，收集主峰，冻干得CY7.5-Isomaltose。

2B）叠氮化与无铜点击（SPAAC路线）：在步骤1中将乙二胺替换为2-叠氮乙胺进行还原胺化，得Isomaltose-N3；随后于PBS（pH 7.2，含≤20% DMSO）中加入1–1.5 eq CY7.5-DBCO，避光温和搅拌1–3 h 即得三唑键连接的产物。

3）纯化与表征：G-25（水/0.1 M NaCl）除盐→分析HPLC确认纯度→UV-Vis/荧光测定DOL（按A_780 与糖含量计算）→MS确认分子量分布。

注意：全程避光；控制pH（NHS耦联7.2–8.5；还原胺化约5.5）；有机助溶剂不过量以免染料自聚；目标DOL常设为≈1，便于后续定量与界面自组装应用。

产品名称：CY7.5-Isomaltose，CY7.5标记异麦芽糖

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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