CY7-reactive-protein，CY7标记反应蛋白的反应机理

CY7-reactive-protein 指通过共价键将近红外荧光染料 CY7 与蛋白质偶联的荧光探针。常见的标记策略是利用蛋白表面存在的亲核基团（赖氨酸残基上的 ε-氨基，或半胱氨酸残基上的巯基）与活化的 Cy7 衍生物（如 Cy7-NHS 酯、Cy7-马来酰亚胺、Cy7-DBCO 等）发生特异反应。这样得到的 CY7-蛋白共轭物不仅保持了蛋白的结构与功能，还具备近红外成像能力。该类荧光标记蛋白应用于细胞膜受体成像、蛋白运输研究、分子相互作用检测以及生物正交化学体系中的探针设计。由于 CY7 信号穿透深、背景低，因此特别适合在活体条件下进行蛋白动态追踪。表征方法包括 SDS-PAGE 荧光检测、紫外-可见吸收（A280 与 A750 校正计算标记度）、质谱与功能学实验。

反应机理

赖氨酸标记（NHS 酯途径）

CY7-NHS 酯在碱性条件下（pH 8.3–8.6）可被蛋白表面的赖氨酸 ε-氨基或 N-端氨基攻击。

机理为：氨基的孤对电子攻击活化的羧酸酯羰基，形成四面体中间体，继而释放 NHS 离子，生成稳定的酰胺键。

优点：操作简便，适用于多数蛋白。

缺点：标记位点不唯一，易发生多点修饰，影响蛋白活性。

半胱氨酸标记（马来酰亚胺途径）

CY7-马来酰亚胺可与蛋白中的巯基通过 Michael 加成反应共价结合。

机理为：半胱氨酸巯基在中性–弱碱性条件下（pH 6.5–7.5）部分解离成硫负离子，进攻马来酰亚胺双键的 β-位碳，形成稳定的硫醚键。

优点：选择性高，只标记暴露的半胱氨酸。

缺点：依赖蛋白半胱氨酸数量与空间位置。

生物正交标记（SPAAC 或 IEDDA）

若蛋白先通过遗传编码或化学修饰引入叠氮基（–N3）或四嗪基团，可利用 Cy7-DBCO 或 Cy7-四嗪进行铜自由点击反应。

SPAAC（应变促进叠氮-炔环加成）：DBCO 高张力环炔与叠氮基自发环加成，形成 1,2,3-三氮唑共价键。

IEDDA（逆电子需求狄尔斯–阿尔德）：四嗪与张力二烯烃（如 TCO）快速偶联。

优点：选择性极高，对氨基酸残基无干扰，特别适合活体标记。

综合分析

CY7-reactive-protein 的反应机理本质是利用 CY7 衍生物上的活性官能团与蛋白质常见官能团之间的共价反应。NHS 酯–胺酰胺化是常见策略，适合大多数蛋白；马来酰亚胺–巯基反应提供高选择性；而 SPAAC 与 IEDDA 反应代表了先进的生物正交标记方式，适用于体内环境。选择哪种标记方式需根据蛋白性质、目标应用和所需位点选择性来决定。

产品名称：CY7-reactive-protein，CY7标记反应蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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