CY7-Cytochrome-C，CY7标记细胞色素C的结构特点

CY7标记细胞色素C（CY7-Cytochrome-C）是一种将近红外荧光染料CY7共价偶联到细胞色素C（Cytochrome-C, Cyt-C）分子上的功能性复合物。细胞色素C是一种小型、可溶性的血红素蛋白，主要参与线粒体电子传递链和氧化还原反应。其分子由约104个氨基酸残基组成，包含一个血红素辅基，并具有稳定的三级结构。CY7标记赋予细胞色素C近红外荧光特性，可用于生物成像、蛋白质示踪及分子动力学研究，同时保留其的结构和电子传递功能。

结构特点

CY7-Cytochrome-C通过共价偶联形成稳定复合物。CY7通常以NHS酯或马来酰亚胺形式提供活性基团，能够与Cyt-C分子表面的赖氨酸胺基或半胱氨酸巯基反应形成酰胺键或硫醚键。标记过程中，通常选择远离血红素活性中心的赖氨酸残基进行偶联，以避免干扰其电子传递能力。偶联后，Cyt-C分子保留其三维折叠结构和血红素配位环境，而CY7染料提供长波长近红外荧光信号，实现蛋白质的可视化和动态追踪。

结构合成步骤概述

蛋白质准备

将纯化的细胞色素C溶解在适宜缓冲液中（如PBS或碳酸盐缓冲液），pH控制在7.4–8.5，以保持蛋白质构象及赖氨酸胺基的活性。此步骤保证偶联反应发生在功能性残基上，同时避免蛋白质失活或血红素脱落。

CY7活性衍生物准备

CY7染料通过化学方法制备为NHS酯或马来酰亚胺衍生物，溶解在DMSO或少量有机溶剂中，避光保存，以防止光降解或水解。溶液浓度与蛋白质摩尔比需计算，以调控偶联密度，既保证足够荧光信号，又避免过度修饰导致蛋白质聚集或功能损失。

偶联反应

将CY7活性衍生物缓慢加入Cyt-C溶液中，在室温条件下轻轻搅拌。赖氨酸胺基对CY7-NHS酯羰基碳进行亲核攻击，形成稳定的酰胺键；若使用马来酰亚胺，则半胱氨酸巯基参与Michael加成反应，生成硫醚键。整个反应通常持续数小时至十余小时，确保偶联均一并保持蛋白质活性。

反应监控与优化

偶联过程可通过紫外-可见光谱监测CY7吸收峰（约750 nm）出现情况，同时结合荧光光谱评估标记效率。蛋白质结构可通过圆二色谱（CD）或荧光酶标测试进行稳定性评估。通过调节pH、温度及CY7与Cyt-C摩尔比，可实现标记效率与蛋白质功能的平衡。

纯化与分离

反应完成后，体系中可能含有未反应的CY7、低分子副产物及少量聚集体。常用方法包括透析、超滤和反相高效液相色谱（HPLC），去除游离染料并富集标记蛋白。纯化过程需避光操作，并控制温度以维持蛋白质活性与荧光性能。

结构表征

纯化后的CY7-Cytochrome-C可通过UV-Vis光谱确认血红素及CY7的特征吸收峰，荧光光谱验证近红外发射特性。质谱分析（MS）可检测标记位点及偶联程度，确保分子均一性。SDS-PAGE结合荧光扫描可进一步验证产物纯度与分子量。圆二色谱（CD）及活性测定可评估蛋白折叠和功能保留情况。

总结

CY7标记细胞色素C通过控制偶联条件，实现了荧光功能与蛋白质结构及电子传递能力的兼顾。该复合物在化学研究、分子示踪、蛋白质动力学及生物成像中具有应用价值，可用于高灵敏度、非破坏性的蛋白质研究，为基础生物化学及生物医学研究提供可靠实验工具。

产品名称：CY7-Cytochrome-C，CY7标记细胞色素C

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09