常用名 5'-荧光素氨基磷酸酯
英文名 6-FAM phosphoramidite
CAS号 204697-37-0
分子量 843.94100
分子式 C46H58N3O10P
5'-荧光素氨基磷酸酯 是一种以荧光素(Fluorescein)为核心的功能化分子,用于标记和修饰寡核苷酸或其他生物分子。其结构特点是荧光素分子通过氨基磷酸酯基团连接到核苷酸的5'端,从而实现高效、稳定的荧光标记。
化学结构上,5'-荧光素氨基磷酸酯通过氨基磷酸酯官能团实现与目标分子的共价连接。氨基磷酸酯是一种活性官能团,能够与寡核苷酸或其他含羟基的分子在适当条件下形成稳定的磷酸酯键。这种共价结合方式保证了标记的持久性,即使在复杂的缓冲体系或长期储存条件下,也能保持荧光信号的稳定性。同时,氨基磷酸酯的化学活性相对温和,在中性或微碱性条件下即可完成反应,不会破坏核酸链或其他敏感分子结构。
在应用方面,5'-荧光素氨基磷酸酯主要用于寡核苷酸的标记,例如在DNA、RNA探针合成中,用于荧光检测、序列分析、杂交实验和成像研究。通过将荧光素引入5'端,可以在不干扰分子功能的情况下,实现高特异性的荧光信号追踪。此外,它也可用于标记小分子化合物、多肽或其他生物分子,从而扩展了其在生物分析、分子识别和荧光成像中的应用范围。标记完成后,通常采用透析、凝胶过滤或离心柱去除未反应的自由荧光素,从而保证信号特异性和实验重复性。
5'-荧光素氨基磷酸酯具有优良的光稳定性和抗光漂白能力,即使在长时间的激发条件下,也能保持强烈、稳定的荧光信号。这对于需要长时间观察的实验、动态成像或多次扫描实验尤为重要。此外,它的水溶性较好,可在多种缓冲体系中均匀分散,便于实验操作。
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