RB-Bilirubin，罗丹明修饰胆红素的合成步骤

RB-Bilirubin（Rhodamine B-Bilirubin）是一种将胆红素（Bilirubin）与罗丹明 B（Rhodamine B, RB）荧光染料通过共价偶联形成的功能性衍生物，兼具胆红素的生物化学活性与罗丹明的明亮荧光特性，可用于化学研究、分子成像、药物递送及生物检测。胆红素是血红素代谢的终产物，分子中含有多个共轭双键和羟基、酮基等活性官能团，具有的光敏性和金属离子结合能力，其化学特性使其在生物体系中参与氧化还原反应及信号传导过程。通过将 RB 引入胆红素分子，可在保持分子活性的同时，实现荧光可视化，为体外实验和分子机制研究提供直观工具。

从化学结构上看，RB-Bilirubin 主要由三部分组成：① 胆红素骨架，包括共轭双键体系、内酮和外源羟基，提供分子的生物活性和化学反应位点；② 罗丹明 B 荧光团，含芳香共轭环和胺基或活性酯，可发射明亮橙红色荧光（激发波长约 540–555 nm，发射波长约 565–580 nm），量子产率高且光稳定性优良；③ 偶联链，通过酯键或酰胺键将 RB 与胆红素连接，使荧光团与胆红素核心空间分离，减少对分子活性和光学性能的干扰。

RB-Bilirubin 的合成过程主要围绕胆红素活化和罗丹明 B 偶联展开，研究重点包括提高偶联效率、保持分子稳定性及优化荧光性能。典型的合成步骤概述如下：

胆红素活化：胆红素分子中羟基或羧基通常需要进行活化，以提供与 RB 偶联的反应位点。常用方法包括将羟基转化为碳酸酯或酸酐，或将羧基转化为 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯，为荧光偶联提供高效的亲电中心。

罗丹明 B 衍生化：将 RB 转化为活性酯形式（如 RB-NHS）或通过胺化反应引入可反应基团，以便与胆红素活化位点形成稳定共价键。此步骤需保证 RB 荧光核心不受破坏，同时提供高亲核性位点以实现高效偶联。

偶联反应：在温和缓冲体系中（通常 pH 7–8 的 PBS 或有机混合溶剂体系），胆红素活化位点与 RB 活性酯进行亲核取代反应，生成稳定的酰胺键或酯键，释放小分子副产物（如 N-羟基琥珀酰胺）。反应温度与时间需控制，以避免胆红素分子因光或氧化而降解，同时确保偶联效率。

纯化与分离：偶联反应完成后，通过硅胶柱层析、反相 HPLC 或透析去除未反应的 RB、胆红素及副产物，获得高纯度 RB-Bilirubin。纯化过程重点是保持分子结构完整、光学特性和水溶性，同时去除潜在的光敏副产物。

表征研究：通过质谱（MS）确认分子量与偶联成功，核磁共振（1H NMR、13C NMR）验证结构完整性，UV-Vis 光谱和荧光光谱测定光学性能。RB-Bilirubin 应保持罗丹明 B 的激发与发射特性，同时保留胆红素的化学活性和稳定性。

合成过程研究中，RB-Bilirubin 的关键问题包括：一是胆红素易光敏和氧化，因此整个反应需在避光、低温条件下进行；二是偶联位置选择性，以避免干扰胆红素的关键活性位点；三是荧光团和胆红素分子空间独立，确保荧光性能稳定并兼顾分子活性。

总之，RB-Bilirubin 是通过胆红素羟基或羧基活化与罗丹明 B 活性酯偶联形成的荧光标记化合物。其合成过程包括胆红素活化、RB 衍生化、温和偶联、纯化及表征，研究重点是偶联效率、分子稳定性和荧光特性。RB-Bilirubin 在化学研究中可用于分子行为追踪、药物递送分析和生物成像，为胆红素相关化学机制和功能研究提供了可靠的实验工具。

产品名称：RB-Bilirubin，罗丹明修饰胆红素

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09