Cy5.5-Ce6，花菁染料CY5.5标记二氢卟吩的制备方法概述

Cy5.5-Ce6是一种将近红外荧光染料CY5.5与叶绿素衍生物二氢卟吩（Chlorin e6, Ce6）偶联得到的双功能分子探针。Ce6是一种四吡咯大环化合物，具有强烈的光敏化学反应活性和优良的光动力特性，常用于光敏研究与光响应体系。CY5.5属于典型的花菁类染料，其激发波长约675 nm、发射波长约695 nm，位于近红外区间，具有组织穿透深度大和自发荧光干扰低的优点。将两者结合，可以兼顾Ce6的光敏活性与CY5.5的成像性能，实现与成像一体化的功能化分子。

从分子结构上看，Ce6具有三个羧基官能团（位于C-13、C-15和C-17位），这些羧基为化学修饰提供了理想的位点。通常通过活化羧基与胺基反应，可实现与含氨基的染料或分子偶联。而CY5.5常以NHS酯形式提供反应活性，可以与Ce6分子上的氨基修饰片段或氨基化衍生物发生酰胺化反应。通过这种方式得到的Cy5.5-Ce6共轭物同时保留了Ce6的大环结构与CY5.5的长共轭荧光骨架。

制备方法概述

原料准备

Ce6 通常来源于叶绿素a的化学衍生化，市售可直接获得，含有三个羧基位点，溶解性较好。

CY5.5-NHS酯 或带有活性酯基团的衍生物，用作与Ce6反应的荧光基团。

偶联反应

Ce6分子中的羧基可通过碳二亚胺（EDC）与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）体系活化，形成NHS酯，然后与氨基修饰的CY5.5进行反应，得到稳定的酰胺键连接。另一种常见方法是使用CY5.5-NHS与Ce6的氨基衍生物反应。

将Ce6溶于DMSO或DMF中，并加入EDC/NHS进行羧基活化；

随后加入带有伯胺的CY5.5衍生物，在弱碱性条件（pH 7.5–8.5）下反应数小时；

通过控制摩尔比和反应时间，可调控标记程度，避免多点交联影响分子性能。

纯化步骤

反应结束后，常采用制备型高效液相色谱（HPLC）或透析去除游离染料和未反应原料。由于Ce6和CY5.5均具有强吸收峰，可利用紫外-可见光谱检测确认偶联效率。纯化后的Cy5.5-Ce6呈现深红色或紫色溶液，溶解性良好，稳定性较高。

表征方法

质谱（MS）：确认分子量与偶联成功。

核磁共振（¹H NMR、¹³C NMR）：验证大环结构完整性与修饰位点。

紫外-可见光谱（UV-Vis）：同时显示Ce6的Soret带和Q带吸收峰，以及CY5.5在近红外区的吸收峰。

荧光光谱：确认CY5.5的发射特性是否保留。

化学与功能特性

Cy5.5-Ce6在物理化学性质上兼具Ce6的光敏性与CY5.5的近红外成像性能。Ce6的大环结构赋予其在生物膜中的良好插入性与光敏产生活性氧的能力，而CY5.5标记使得该分子能够实现体内分布、定位及作用过程的实时成像。此外，两亲性结构使其既能在水溶液中保持一定溶解度，又可通过与脂质或高分子载体自组装形成稳定复合物，进一步提高应用潜力。

产品名称：Cy5.5-Ce6，花菁染料CY5.5标记二氢卟吩

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09