CY5-CSTSMLKAC，花菁染料CY5标记CSTSMLKAC心肌靶向肽的合成步骤概述

CY5-CSTSMLKAC是一种基于荧光染料与心肌靶向肽偶联的荧光探针，其中CSTSMLKAC为来源于噬菌体展示筛选得到的心肌组织高亲和性肽序列，能够选择性结合心肌细胞或心肌组织相关受体，在纳米药物递送和组织成像中被研究。其氨基酸序列两端含有半胱氨酸（Cys），可通过二硫键形成稳定环状结构，从而增强空间稳定性与受体结合能力。同时，序列中的丝氨酸（Ser）、苏氨酸（Thr）和赖氨酸（Lys）提供了亲水性与额外的偶联位点，使其适合在水相条件下进行化学修饰。将近红外花菁染料Cy5标记在该肽段上，不仅能赋予探针优异的光学成像能力，还能保留其心肌靶向特性，因此CY5-CSTSMLKAC被认为是一种兼具成像与靶向功能的双功能分子。

合成步骤概述

多肽合成

CSTSMLKAC肽段一般采用固相合成法（SPPS）制备。常用的策略为Fmoc固相合成：在树脂（如Rink amide树脂）上逐步引入各个Fmoc保护的氨基酸单体。每一循环包括脱除Fmoc保护、氨基酸活化与缩合反应（常用HBTU/HOBt或DIC/Oxyma作为缩合剂）。合成完成后，将肽链从树脂上切除，并去除侧链保护基团，得到粗肽。粗产物通过反相高效液相色谱（RP-HPLC）进行纯化，随后用质谱（MALDI-TOF或ESI-MS）确认序列与分子量。若需要环肽形式，可在合成后通过空气氧化或DMSO氧化实现Cys-Cys二硫键的形成，从而获得结构稳定的环状CSTSMLKAC。

Cy5活化染料的选择

Cy5作为花菁染料，常以活性酯或马来酰亚胺形式存在。若要通过赖氨酸残基的ε-氨基或N端氨基与Cy5偶联，可选择Cy5-NHS ester，通过与胺基反应生成稳定的酰胺键；若通过半胱氨酸残基进行位点特异性偶联，则可选择Cy5-Maleimide，与巯基发生Michael加成反应形成硫醚键。对于CSTSMLKAC而言，末端的Cys残基可作为偶联位点，因此Cy5-Maleimide是常用选择，可确保荧光标记的位点特异性，避免破坏赖氨酸在生物识别中的作用。

偶联反应

将合成并纯化后的CSTSMLKAC溶解于缓冲液中（如PBS或HEPES，pH 7.2–7.4），以确保巯基保持还原态。常需加入TCEP或DTT预处理以防止Cys形成二硫键。随后，将Cy5-Maleimide溶于少量DMSO并逐滴加入肽溶液中，在室温下避光搅拌数小时。反应过程中，巯基与马来酰亚胺基团迅速结合，生成稳定的硫醚键。反应结束后，使用超滤或HPLC分离去除未反应的游离染料，得到目标产物CY5-CSTSMLKAC。

纯化与确认

产物纯化主要采用制备型RP-HPLC，检测波长可设置在220 nm和650 nm，以同时监控肽链与Cy5染料。收集目标峰后冻干，获得纯净的CY5-CSTSMLKAC。结构确认通常通过质谱分析（MALDI-TOF或LC-MS），比对理论分子量与实测值以确认偶联成功。进一步可以利用紫外-可见光谱与荧光光谱检测其吸收与发射峰是否与Cy5一致，确保光学性能保持。

表征与应用验证

终产物CY5-CSTSMLKAC应表现出Cy5特征的近红外发射峰，并保持肽段的心肌靶向特性。其稳定性可通过在不同pH、温度和生物基质中的荧光保持率进行验证。功能上，可在细胞水平或动物模型中进行靶向实验，通过共聚焦显微镜或小动物活体成像系统检测其在心肌组织中的富集情况，从而确认其作为靶向成像探针的应用潜力。

产品名称：CY5-CSTSMLKAC

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

ICG-Angiopep-2

吲哚菁绿标记Angiopep-2

ICG-Azide;吲哚菁绿标记叠氮

ICG-Baicalein

吲哚菁绿标记黄芩素

ICG-Bilirubin

吲哚菁绿修饰胆红素

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09