CY5-MMP9,花菁染料CY5标记MMP9多肽的反应机制
CY5-MMP9是以近红外花菁染料Cy5与MMP9底物肽段偶联得到的荧光探针,其中MMP9指基质金属蛋白酶9(Matrix Metalloproteinase-9),其活性在多种组织重构及基质降解过程中起关键作用。MMP9底物肽通常含有特定可切割的氨基酸序列(如 Pro-Leu-Gly~Leu/Ala-Gly 等),在MMP9存在下被选择性断裂。将Cy5标记在该肽段上可构建荧光响应型探针,利用MMP9介导的切割实现信号的变化与成像监测。
反应机制
CY5-MMP9探针的核心机制是基于酶特异性肽键断裂引起的荧光信号变化:
化学修饰机制
Cy5通常以NHS酯或马来酰亚胺活化形式与肽链进行共价偶联。例如在N端或赖氨酸残基上,Cy5-NHS与游离胺基通过亲核取代反应生成稳定的酰胺键,固定在肽链上。若探针设计为双标结构,Cy5可与猝灭剂(如BHQ-3)通过肽段连接,此时荧光被猝灭。
酶识别与切割
MMP9属于锌离子依赖性内切蛋白酶,其催化中心含有Zn²⁺配位基团。MMP9通过底物肽结合槽识别特定序列,并利用活性位点中的水分子对肽键羰基进行亲核攻击。在Zn²⁺离子的稳定作用下,水分子活化为羟基阴离子,进而攻击底物肽键,导致C-N键断裂。
信号转化机制
单标记型探针:当MMP9切割后,Cy5标记的片段释放进入体系,荧光信号在空间或强度上发生改变,可通过显微镜或活体成像系统检测。
双标记猝灭型探针:若Cy5与猝灭剂通过MMP9底物肽段相连,在完整状态下荧光被猝灭。当肽段被切割,Cy5与猝灭剂分离,荧光信号恢复,从而实现酶活性的“turn-on”成像。
动力学与特异性
MMP9对底物肽的识别效率依赖于序列特异性,常通过体外酶切实验(SDS-PAGE 或 HPLC检测)确定佳底物。由于不同MMP家族成员具有相似的切割位点,肽序列的设计决定了特异性。
综上,CY5-MMP9通过MMP9特异性肽段的化学修饰与荧光探针设计,将酶催化的肽键水解反应转化为可观测的荧光信号,是研究MMP9活性、组织重构过程及生物学事件的重要化学工具。
产品名称:CY5-MMP9,花菁染料CY5标记MMP9多肽
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
推荐产品:
吲哚菁绿标记柔红霉素
ICG-Deoxycholic acid
吲哚菁绿标记脱氧胆酸
ICG-D-GlutamicAcid
吲哚菁绿标记D-谷氨酸
ICG-Doxorubicin
吲哚菁绿阿霉素
ICG-DPA
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09