Green CMFDA，136832-63-8的物理化学性质-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

Green CMFDA 是一种细胞可渗透型荧光染料，全称为 5-氯甲基荧光素二乙酸酯（5-Chloromethylfluorescein Diacetate），属于荧光素（Fluorescein）衍生物。其独特的化学结构使其能够穿透细胞膜并在细胞内被酯酶水解，从而释放出活性荧光分子，并通过氯甲基官能团与细胞内巯基形成共价结合，实现长期细胞标记。Green CMFDA 以其高灵敏度、明亮绿色荧光和稳定性，广泛应用于细胞追踪、活细胞标记和多代细胞研究。

化学结构与特性
Green CMFDA 由荧光素核心、两个乙酸酯保护基和一个 5-氯甲基官能团组成。乙酸酯基团增加了分子的脂溶性，使染料能够轻松穿透细胞膜。当进入细胞后，细胞内非特异性酯酶水解去除乙酸酯，生成活性荧光分子 5-氯甲基荧光素（CMF），该分子具有绿色荧光发射（约 517–520 nm）特性。生成的 CMF 分子可与细胞内巯基（主要是谷胱甘肽和蛋白质半胱氨酸残基）形成共价键，从而被牢固固定在细胞内，防止随时间和细胞分裂流失。

物理化学性质
Green CMFDA 为疏水性小分子，常溶于 DMSO 或乙醇等极性有机溶剂，但在水中溶解度有限。其荧光特性表现为绿色激发光（约 492 nm）和绿色发射光（约 517–520 nm），信号明亮且背景低。该染料在细胞内稳定性高，可在常规细胞培养条件下保持荧光数天至数代细胞，适合长期细胞追踪。乙酸酯保护基易被细胞酯酶水解，染料活化速度快，且氯甲基官能团提供稳定的细胞内固定能力。

主要应用

活细胞追踪：Green CMFDA 可用于标记活细胞，实现多代细胞追踪和迁移研究。标记后的荧光信号稳定，适合进行时间序列或长期成像。

细胞迁移与运动研究：通过荧光信号监测标记细胞在体外培养或体内模型中的迁移与扩散。

多色荧光实验：绿色荧光发射使其可与其他颜色荧光染料（如红色或蓝色）结合，进行多色共定位或多种细胞群体区分实验。

细胞计数与流式细胞术：标记后的细胞可用于流式细胞仪分析，实现细胞分选、计数及群体特性研究。

药物筛选与功能分析：可结合药物处理实验监测细胞活性、增殖和迁移情况，评估药物效果。

优势特性

高细胞渗透性：乙酸酯保护基增加分子脂溶性，使染料易进入活细胞。

稳定的细胞内标记：氯甲基官能团与细胞内巯基共价结合，避免荧光信号随时间和细胞分裂流失。

明亮绿色荧光：荧光信号高强度，背景低，易于检测和成像。

适合多代细胞追踪：标记可持续数代细胞，适合长期观察和分析。

多用途：可用于活细胞追踪、迁移研究、流式细胞分析、多色成像和功能实验。