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ATTO 633 Acid,ATTO 633-羧酸的化学反应原理
发布时间:2025-10-13     作者:axc   分享到:

ATTO 633 Acid,ATTO 633-羧酸的化学反应原理

ATTO 633 Acid是一种水溶性红色荧光染料,其核心特点包括:

荧光性质

激发波长约 630 nm,发射波长约 650–660 nm,呈红色荧光。

高量子产率和光稳定性强,适合多通道荧光成像和长期观察。

羧酸功能基团

分子末端羧基(–COOH)提供化学活性位点,可进一步活化形成NHS酯或其他衍生物。

提供水溶性,同时保持分子可偶联性和化学反应潜力。

水溶性优势

适合在水相缓冲体系中进行生物化学反应和偶联。

可直接用于蛋白质、抗体或多肽的水相标记实验。

2. 化学反应原理

ATTO 633 Acid本身不直接与蛋白质或多肽偶联,需要通过羧酸活化形成高反应性中间体,常见活化方法包括:

(1) NHS酯化活化

原理

羧基(–COOH)通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)与碳二亚胺试剂(如EDC)活化生成ATTO 633 NHS Ester。

NHS酯具有高反应活性,可在温和条件下与蛋白质或多肽伯胺(–NH₂)反应生成稳定酰胺键。

反应机制

EDC与羧基形成O-酰基化中间体。

NHS取代EDC生成稳定NHS酯。

伯胺亲核攻击NHS酯羰基,NHS离去,形成共价酰胺键。

条件控制

pH 7–8的缓冲液(PBS或HEPES)适合。

室温操作即可完成,反应时间1–4小时。

控制摩尔比可调控偶联度,避免荧光淬灭或蛋白质功能损伤。

(2) 其他活化方法

碳二亚胺活化

可直接使用EDC将羧酸与伯胺耦合,无需生成NHS酯,但水相中选择性稍低。

水解调控

羧酸或其衍生物在高pH条件下可部分水解,需避免反应体系过碱或长时间暴露。

3. 化学研究与应用

蛋白质标记

活化后的ATTO 633可标记抗体、酶或多肽,用于流式细胞术、免疫荧光、Western blot等。

纳米载体及材料功能化

羧酸活化后可与氨基修饰的纳米颗粒、聚合物或玻璃表面共价偶联,实现荧光可视化。

FRET及光化学研究

ATTO 633作为远红色荧光染料,可与其他荧光分子形成FRET对,用于能量转移及分子相互作用研究。

多功能标记平台

通过羧酸活化和多步偶联,可在生物分子或材料表面构建多功能荧光标记体系。

4. 注意事项

NHS酯化中间体需干燥有机溶剂储存,防止水解。

避光保存,防止荧光衰减。

控制pH和摩尔比,保证偶联效率和标记度。

产品名称:ATTO 633 Acid

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

ATTO 633 Acid

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09


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