5-FAM-Biotin 5-羧基荧光素标记生物素的化学结构

5-FAM-Biotin（5-羧基荧光素标记生物素） 是一种功能化荧光探针，由生物素分子通过化学偶联与5-羧基荧光素（5-Carboxyfluorescein, 5-FAM）连接而成。5-FAM-Biotin兼具生物素的高亲和力特性与5-FAM的绿色荧光特性，其吸收峰约为495 nm，发射峰约为520 nm，可在荧光显微镜、流式细胞术及分子标记实验中提供可视化信号。该分子广泛应用于蛋白质标记、核酸标记、分子探针开发及免疫分析等研究领域。

5-FAM-Biotin的化学结构包含三个主要功能模块：生物素核心、羧基荧光素以及连接桥（通常为酰胺键或其他可控链接结构）。生物素作为小分子维生素，能够与链霉亲和素（Streptavidin）和亲和素（Avidin）形成高亲和力非共价结合，为荧光探针提供靶向结合能力。5-FAM部分则通过其羧基官能团提供化学反应位点，可通过活化偶联或其他共价化学策略与生物素分子连接，从而构建功能化的荧光标记分子。

反应机理方面，5-FAM-Biotin的制备通常依赖羧基活化和酰胺键形成。具体机理可描述如下：首先，5-FAM的羧基通过羧活化剂（如EDC, 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺）生成O-酰基中间体，通常与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）结合，形成稳定的活性酯。该活性酯具有较高的电子亲和性，可被生物素分子上的氨基（通常位于生物素连接桥上）攻击。随后，氨基作为亲核试剂对活性酯进行亲核进攻，发生酰胺化反应，形成稳定的酰胺键，将5-FAM与生物素共价连接。该过程具有反应条件温和、选择性高、效率可控的特点，可在弱碱性缓冲体系中实现高效偶联。

在反应过程中，EDC/NHS体系的作用不仅是羧基活化，还可抑制副反应的发生，例如羧基与水分子的水解。NHS活性酯中间体提高了羧基的亲电子性，使其能够被氨基迅速攻击，而无需高温或有机溶剂，有助于保持生物素和荧光素的结构稳定性及功能活性。偶联完成后，通常通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的5-FAM及副产物，获得高纯度的5-FAM-Biotin。

5-FAM-Biotin的化学特性和反应机理赋予其在生物研究应用中的独特优势。通过生物素-链霉亲和素系统，可以实现高亲和力、可控定位的靶向标记；通过5-FAM的荧光特性，可以在细胞内或体外实验中进行可视化检测与定量分析。在蛋白质或核酸标记中，5-FAM-Biotin能够结合目标分子，同时保持荧光信号和生物素识别能力，使其在荧光免疫分析、流式细胞术、分子成像及药物递送研究中应用广泛。

此外，5-FAM-Biotin具有良好的水溶性和光学稳定性，可在缓冲体系中长期储存。在实验操作中，可通过调节反应摩尔比、pH值及缓冲体系，优化偶联效率和标记密度，从而实现功能化探针的可控制备。

总体而言，5-FAM-Biotin（5-羧基荧光素标记生物素） 是一种结合羧基活化偶联化学和生物素-链霉亲和力特性的功能化荧光分子。其通过EDC/NHS活化偶联机制形成稳定酰胺键，实现荧光素与生物素的共价结合，为蛋白质、核酸及纳米材料的标记、追踪及成像提供高效、可控、可靠的实验手段，是分子探针设计和生物化学研究的重要工具。

产品名称：5-FAM-Biotin

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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