AF532 NHS Ester，Alexa Fluor 532 N-羟基琥珀酰亚胺酯的标记反应

中文名称：Alexa Fluor 532 N-羟基琥珀酰亚胺酯

描述：AF532 NHS Ester 是一种功能化荧光染料衍生物，其核心为 Alexa Fluor 532 荧光染料，末端修饰有活性 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS）官能团。Alexa Fluor 532 属于可见光荧光染料，激发波长约为532纳米，发射波长约在554–560纳米，具有高量子产率、优良的光稳定性和水溶性。NHS 官能团是一种高活性的羧酸活化形式，可与蛋白质、肽链或其他含氨基（–NH₂）的生物分子共价结合，从而实现荧光标记。AF532 NHS Ester 将 Alexa Fluor 532 的荧光性能与 NHS 的高选择性反应性结合，使其在生物标记、荧光探针构建和分子示踪中广泛应用。

反应条件：AF532 NHS Ester 的标记反应主要依赖 NHS 官能团与氨基官能团形成酰胺键。反应条件一般温和，常在中性至弱碱性缓冲体系中进行（pH 7.2–8.5）。典型缓冲液包括磷酸盐缓冲液（PBS）、碳酸盐缓冲液或HEPES缓冲液，这些体系可保证蛋白质或肽链的稳定性，同时维持 NHS 官能团的活性。反应温度通常为室温或4℃，以避免荧光染料的光降解和生物分子的结构改变。

溶剂选择上，AF532 NHS Ester 可溶于水性或极性有机溶剂，如 DMSO 或 DMF。在使用时，常先将 NHS 酯溶解于小体积有机溶剂，再缓慢加入水性缓冲体系中，以避免水分直接引起 NHS 水解。反应时间根据标记体系和底物浓度不同，一般为30分钟至数小时，可通过调整摩尔比或浓度优化标记效率。

反应过程中，底物分子（如蛋白质或肽链）的氨基官能团越多，标记效率越高，但过量 NHS 酯可能引起非特异性修饰或结构变化，因此常通过控制摩尔比和反应时间实现可控标记。反应完成后，需通过透析、凝胶过滤、HPLC 或超滤等方法去除未反应的荧光染料和副产物，以获得纯净的荧光标记产物。

AF532 NHS Ester 标记后的产物通常在室温或4℃避光保存，以维持荧光稳定性。该染料适用于蛋白质、肽链、抗体、核酸和其他氨基功能化分子的标记，广泛应用于荧光成像、流式细胞分析、免疫荧光实验、多色荧光检测以及生物分子追踪。其高量子产率和光稳定性确保实验过程中信号强、背景低，同时 NHS 官能团的高选择性保证了标记反应的高效和可控。

总体而言，AF532 NHS Ester 结合了 Alexa Fluor 532 荧光核心的高光学性能与 NHS 官能团的高化学活性。在温和的中性至弱碱性缓冲条件下，与氨基官能团发生特异性酰胺化反应，实现可控的荧光标记。其反应条件简单、操作温和，适用于蛋白质、肽链、抗体及其他氨基修饰分子的标记和功能化，是分子生物学、细胞生物学及荧光分析实验中高效、可靠的荧光标记工具，为多色成像、定量分析及分子示踪提供稳定的化学平台。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

RB-聚乙二醇-叠氮，RhodamineB-PEG-N3，

RB-聚乙二醇-二苯并环辛炔，RhodamineB-PEG-DBCO，

RB-聚乙二醇-肝素，RhodamineB-PEG-Heparin，

RB-聚乙二醇-硅烷，RhodamineB-PEG-Silane，

RB-聚乙二醇-聚赖氨酸，RhodamineB-PEG-Polylysine，

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09