英文名 FAM NHS ester, 6-isomer

CAS号 890090-41-2

分子量 473.4

密度 1.68±0.1 g/cm3(Predicted)

沸点 812.2±75.0 °C(Predicted)

分子式 C25H15NO9

Carboxyfluorescein NHS Ester (6-isomer) 是一种常用的荧光标记试剂，广泛应用于生物分子标记、检测和分析。它属于羧基荧光素（Carboxyfluorescein, FAM）衍生物，通过6位碳原子上的羧基与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）形成活性酯，实现对氨基或羟基官能团的高效偶联。6-异构体的设计保证了其结构和光学性质的稳定性，使其在各种生物实验中表现出可靠的荧光特性。

荧光特性
6-Carboxyfluorescein NHS Ester 激发波长约为495 nm，发射波长约为520 nm，呈明亮的绿色荧光。它具有高荧光量子产率和良好的光稳定性，适合免疫标记、分子探针和细胞成像等实验。与其他荧光染料相比，FAM 6-异构体在水溶液中保持良好的稳定性，不易自发水解或聚集，从而确保实验数据的重复性和可靠性。此外，其荧光信号对pH有一定敏感性，在pH 7–8条件下表现最佳，适合生物体系使用。

化学特性与偶联反应
NHS 酯端是高反应性的活性酯，可与蛋白质、多肽或其他分子的氨基官能团发生亲核取代反应，形成稳定的酰胺键。反应通常在中性至弱碱性缓冲体系（如PBS pH 7.4–8.5）中进行，操作简便且效率高。由于活性酯在水中易水解，通常建议在干燥溶剂或低水环境中制备反应体系。6-异构体的分子结构稳定，使偶联物在储存和使用中保持一致性，避免荧光性质变化。

应用领域

蛋白质和多肽标记：可将FAM标记物与蛋白或多肽的氨基共价结合，实现荧光追踪和定量分析。

核酸探针制备：常用于DNA或RNA探针的标记，进行原位杂交（FISH）、实时定量PCR及荧光检测。

细胞与组织成像：FAM标记物可用于细胞或组织内生物分子定位，提供高分辨率的绿色荧光信号。

流式细胞术：可用于检测细胞表面或内部生物分子的存在及表达量，适合多参数分析。

分子互作研究：通过标记蛋白或小分子，可实现相互作用研究、结合动力学分析及高通量筛选。

使用注意事项

储存条件：应避光、低温干燥保存（-20℃），防止活性酯水解和荧光衰减。

溶解与反应：可溶于干燥DMSO或DMF，反应体系应避免水分过多，以保证偶联效率。

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