AF 488 C5 Mal，AF 488 C5马来酰亚胺的应用领域-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

AF 488 C5 Maleimide 是基于 Alexa Fluor 488（AF488）荧光染料结构衍生而成的一类专用于巯基（–SH）选择性标记的荧光探针。其分子包含亮度高、光稳定性卓越的 AF488 发色团，以及通过五碳链（C5 linker）连接的 maleimide（马来酰亚胺）反应基团。这种结构设计使得 AF 488 C5 Mal 在生物大分子标记、活细胞成像以及高灵敏度检测方面具有突出的性能，是目前科研界广泛采用的绿色荧光标记试剂之一。

一、分子结构特点与反应机理

AF 488 C5 Maleimide 的核心是 Alexa Fluor 488 染料，其为改良型荧光素类发色团，通过结构优化获得高量子产率、强光稳定性以及良好的抗光漂白性能，使其在各种连续激发或高强度激光扫描条件下仍能保持稳定发光。染料通过一条五碳长度的脂肪链与马来酰亚胺基团连接，使反应位点与染料主体之间保持适度空间间距，有利于降低标记后对蛋白活性或构象的干扰。

马来酰亚胺基团可与生物分子中的巯基（尤其是半胱氨酸残基上的 –SH）发生特异性的 Michael 加成反应。在 pH 6.5–7.5 区间反应效率高，可在温和条件下迅速形成稳定的巯基-马来酰亚胺硫醚键。该反应快速、高效且具有高度选择性，很少与胺类或羟基发生副反应。因此，AF 488 C5 Mal 是蛋白、肽、生物大分子以及纳米材料的理想巯基标记试剂。

二、光谱性质与光学优势

AF 488 是科研常用的高性能绿色荧光染料，具有如下光谱特性：

吸收波长（Ex）：约 495 nm

发射波长（Em）：约 519 nm

量子产率高，亮度显著高于 FITC、FAM 等传统绿色染料

高光稳定性，适用于长时间成像和多重实验

此外，AF 488 的光谱兼容性较好，可与常见的 FITC 滤光片组兼容，也能与多色荧光体系（如 AF555、AF647、Cy3、Cy5 等）搭配使用，适合流式细胞术、荧光显微成像和多重免疫实验。

三、应用领域

蛋白质和抗体的巯基标记
AF 488 C5 Mal 广泛用于单克隆抗体、多肽、酶以及结构蛋白的特异性标记。通过对半胱氨酸残基进行选择性标记，可限度保持抗体活性，并获得定义明确、均一的标记度。

纳米材料与生物探针构建
可与纳米颗粒（如量子点、金纳米粒、聚合物纳米球）的表面巯基反应，实现荧光编码或生物识别功能的构建。

活细胞及固定细胞成像
在细胞内蛋白巯基标记、膜蛋白成像、胞内还原环境探测等方面具有良好表现。AF488 的亮度和抗光漂白特性使其适合共聚焦显微镜和超分辨显微成像。

生物传感器与分子探针开发
常用于构建 FRET 探针、环境响应型荧光探针或酶反应检测体系。

核酸、肽与多糖修饰
通过前期引入巯基，可实现 DNA 寡核苷酸、肽链、多糖的荧光修饰，用于荧光定量、成像或示踪。