ATTO 550 NHS ester，ATTO 550琥珀酰亚胺酯的应用领域-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

ATTO 550 NHS Ester（ATTO 550琥珀酰亚胺酯）是一种高性能、有机小分子荧光染料的活性酯形式，广泛应用于生物分子标记、细胞成像、蛋白质偶联以及先进的光学成像技术。其核心结构属于ATTO系列染料，这类染料以高亮度、优异光稳定性、良好的水溶性以及适合多种光学平台的激发/发射特性而受到科研界的广泛认可。作为NHS（N-hydroxysuccinimide）酯衍生物，ATTO 550 NHS Ester能够与生物分子中的伯胺（–NH₂）基团进行快速、稳定的共价偶联，因此特别适合蛋白质、抗体、肽、寡核苷酸以及其他含有氨基的生物大分子的标记。

一、光谱特性与成像优势

ATTO 550的激发波长约为 554 nm，发射峰大约在 576 nm，属于橙黄色荧光区域，可与常见的546–555 nm激光或氙灯/LED光源完美匹配。其光谱特性与经典的TRITC或Cy3具有一定相似性，但ATTO 550通常表现出更高的量子产率、更强的光稳定性和更低的背景干扰，因此在长时间成像、单分子检测及高通量显微操作中具有明显优势。

相比传统罗丹明类染料，ATTO 550采用优化后的分子结构，使其在光漂白速率以及光电转换效率方面更为优越。长时间曝光和重复扫描条件下，ATTO 550仍能保持较高信号强度，使其特别适用于共聚焦显微镜、荧光扫描仪、TIRF成像系统等需要强光照射的场景。

二、NHS活性酯特性与偶联化学

ATTO 550 NHS Ester包含一个稳定但反应性良好的琥珀酰亚胺酯基团，可与生物分子表面的伯胺在弱碱条件下（一般 pH 8.0–9.0）发生酰胺键形成反应。该反应速度快、选择性高、产物稳定，不会破坏目标蛋白或生物分子的功能构象。

常用偶联条件包括：

缓冲体系：碳酸盐缓冲液、PBS（调整pH）、HCO₃⁻缓冲液等，避免含有游离胺的缓冲液如 Tris。

溶剂：ATTO 550 NHS Ester通常溶于DMSO或DMF后加入反应体系；

反应时间：数分钟至1小时即可完成多种生物分子的标记；

反应温度：室温即可，也可在低温下减缓反应速度以获得更佳标记控制。

标记完成后，通过凝胶过滤、透析或HPLC可去除游离染料，并得到纯净的荧光标记蛋白或其他生物分子。

三、应用领域

ATTO 550 NHS Ester因其优异的光学和化学性质，适用于多种生物医学研究场景：

1. 蛋白/抗体标记

ATTO 550能够与抗体的赖氨酸残基快速反应，是免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测等常规实验中的理想标记染料。其明亮的橙黄荧光使其在图像中易于识别，且可与绿光、红光等其他颜色实现多重成像。

2. 寡核苷酸和DNA探针标记

ATTO 550 NHS Ester可用于标记合成寡核苷酸，制备具有特定荧光性质的探针，用于FISH杂交、实时PCR检测（qPCR）、DNA定位分析及核酸-蛋白相互作用研究。

3. 细胞与组织成像

标记后的抗体或生物探针可用于固定细胞或活细胞的荧光成像。ATTO 550的高光稳定性特别适用于高分辨显微结构、细胞轨迹追踪以及长期观察实验。